[發明專利]一株油菜內生菌解淀粉芽孢桿菌4?3及其應用方法

有效

• 申請號: 201410503991.5
• 申請日: 2014-09-26
• 公開（公告）號: CN104312945B
• 公開（公告）日: 2017-06-06
• 發明（設計）人: 劉冬華;伍善東;郭照輝;單世平
• 申請（專利權）人: 湖南省微生物研究院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所43114
• 代理人: 袁靖

技術領域：

本發明涉及一株油菜內生細菌解淀粉芽孢桿菌4-3及其應用。

背景技術：

油菜是我國主要的油料作物，油菜菌核病(Sclerotinia sclerotiorum)是油菜生產中的三大病害之一，在我國南方油菜產區發病尤其嚴重，發病率一般在10％～30％,嚴重的高達80％以上,造成巨大經濟損失(邱業先，汪金蓮，王衛芳等.油菜菌核病抗性誘導菌的篩選[J].江西農業大學學報,1996,12(18):395-398.)。在長江中下游及東南沿海主要油菜產區，包括江蘇、安徽、上海、浙江、湖南、湖北、江西等地發生尤為突出，嚴重影響了我國的油菜生產。目前，在生產上以選擇抗病品種和化學藥劑進行防治，但存在抗病品種資源缺乏和化學藥劑污染農產品和環境等問題，而生物防治具有對環境污染小，成本低，作用持久等優點越來越受到人們的重視。

內生菌(endophyte)是指那些在其生活史的一定階段或全部階段生活于健康植物的各種組織和器官內部對植物組織不引起明顯病害癥狀的微生物。已發現的內生細菌對宿主植物的有益作用有固氮作用、促進植物生長、抗逆境、抗動物攝食、抗病原真菌和細菌等(鄒文欣，譚仁祥.植物內生細菌研究新進展[J].植物學報，2001，43(9)：881—892.)。據報道，現已從棉花、水稻、馬鈴薯和辣椒等多種植物中分離篩選到對植物病害具有生防作用的內生細菌(江木蘭，趙瑞，胡小加，等.油菜內生生防菌BY-2在油菜體內的定殖與對油菜菌核病的防治作用[J].植物病理學報，2007，37(2):192-196.)。張獻芳等從油菜和水稻植株上分離到內生細菌后，分別用利福平和硫酸鏈霉素標記目標菌株，再以浸種，灌根和接種無菌苗3種方法接種油菜后，均可以在油菜體內分離到被標記的菌株(張獻芳，文凱，逯晉忠，等.2株內生細菌在油菜體內的定殖、促生長及抗蟲性檢測[J].華中農業大學學報，2011，4(30):143-147.)。

陳英化等報道了從棉花健株莖內分離篩選到一株棉花黃萎病內生拮抗細菌L-4-2為解淀粉芽孢桿菌，用100mg·L^-1利福平誘導菌株后，能在棉花的根、莖中分離到該菌株。(陳英化，李愛霞，馮麗娜等.棉花黃萎病內生拮抗細菌L-4-2的鑒定及定殖[J].西北農業學報，2012，21(2)：68-71)。張榮勝等報道了菌株Lx11為解淀粉芽孢桿菌，盆栽試驗結果表明Lx11對水稻細菌性條斑病菌的防效達62.5％，大面積示范試驗結果表明菌株Lx11對水稻細菌性條斑病菌的田間防效達60.2％，顯著高于化學藥劑20％葉枯唑的防效(51.2％和45.8％)，(張榮勝，劉永鋒，陳志誼.水稻細菌性條斑病菌拮抗細菌的篩選、評價與應用研究[J].中國生物防治學報，2011，27(4)：510-514)。

發明內容：

本發明的目的在于提供一株油菜內生細菌及其在拮抗核盤病菌和促進無機磷、有機磷和不溶性鉀的吸收上的應用，以提高油菜拮抗菌核病的能力和促進油菜對無機磷、有機磷和不溶性鉀的吸收。

解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)4-3，保藏編號為CCTCC NO:M 2014320。

培養所述的解淀粉芽孢桿菌4-3的培養基，其特征在于，

培養基配方：甘露醇1.8g、胰蛋白胨1.6g、NaCl 0.4g、MgSO₄·7H₂O 0.3g、KH₂PO₄0.4g、1％MnSO₄ 0.2ml、1％FeC₆H₅O₇ 0.5ml、1％Na₂MoO₄·2H₂O 0.4ml、去離子水100ml、pH7.2。

所述的解淀粉芽孢桿菌4-3的應用方法，用于拮抗核盤病菌。尤其是用于拮抗引起油菜菌核病的核盤病菌。

所述的解淀粉芽孢桿菌4-3的應用方法，用于降解無機磷、有機磷和解鉀。

所述的無機磷包括磷酸三鈣。

所述的有機磷包括卵磷脂。

所述的鉀包括鉀長石粉。

所述的解淀粉芽孢桿菌4-3的應用方法，用于發酵制作油菜增產的菌肥。

用于所述的解淀粉芽孢桿菌4-3發酵的培養基，淀粉2.0g、黃豆粉1.0g、甘露醇0.1g、蛋白胨0.2g、NaCl 0.2g、MgSO₄·7H₂O 0.05g、水100ml、pH7.2。