[發明專利]一種基于金納米顆粒構建多功能基因治療載體的方法有效
| 申請號: | 201410494430.3 | 申請日: | 2014-09-24 |
| 公開(公告)號: | CN104306987B | 公開(公告)日: | 2017-06-23 |
| 發明(設計)人: | 徐福建;趙娜娜;閆彭 | 申請(專利權)人: | 北京化工大學 |
| 主分類號: | A61K48/00 | 分類號: | A61K48/00;A61K47/02;A61K49/18;A61K49/14 |
| 代理公司: | 北京同恒源知識產權代理有限公司11275 | 代理人: | 張水俤 |
| 地址: | 100029 北京市*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 基于 納米 顆粒 構建 多功能 基因治療 載體 方法 | ||
1.一種基于球形金納米顆粒構建多功能基因治療載體的方法,其特征在于:
1)球形金納米顆粒合成:向圓底燒瓶中加入50mL H2O和0.5mL濃度為0.24M的HAuCl4溶液,混合均勻,放入135℃油浴中,攪拌,待其沸騰,加入450μL質量分數為1%的檸檬酸鈉,繼續攪拌2min;取出,放入27℃水浴冷卻,加入1.82g十六烷基三甲基溴化銨,攪拌12h;7000rpm離心得到沉淀;
2)牛血清蛋白修飾ATRP引發點:先將0.1g 2-溴異丁酰溴加入2mL DMF中,然后加入0.2885g 1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二酰亞胺、0.15g N-羥基琥珀酰亞胺、500μL三乙胺;最后加入5mL pH=7.4的PBS緩沖液和0.2g牛血清蛋白;37℃攪拌反應48h;透析凍干得到BSA-Br;
3)制備金納米顆粒引發劑:將合成的球形金納米顆粒3mg再次離心,然后與10mg BSA-Br混合,用H2O稀釋到5mL,40℃反應48h,離心水洗滌,得到金納米顆粒引發劑;
4)聚合反應:氮氣環境下,先將4mg金納米顆粒引發劑溶于1mL水,然后加入1mL甲醇、0.5mL甲基丙烯酸N,N-二甲氨基乙酯,再加入25μL的五甲基二乙烯三胺,最后加入1mg CuBr2、9mg CuBr,30℃反應30min;
5)聚合反應完成后暴露在空氣中,使引發體系失活和終止聚合,然后放入截留分子量為2500-4500MW的透析袋中,在去離子水中透析;最后將透析袋中的產物冷凍干燥直至除去所有水分即得基于球形金納米顆粒構建多功能基因治療載體。
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