[發明專利]NK718三系配套雜交種制種方法

有效

• 申請號: 201410493914.6
• 申請日: 2014-09-24
• 公開（公告）號: CN104351037A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 趙久然;宋偉;邢錦豐;王元東;段民孝;劉春閣;馮培煜;張如養;王鳳格;毛振武;李瑞媛;王乃順;王文廣;張莎莎
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;白艷

1.一種雜交制種的方法，包括如下步驟：以玉米不育系S京464為不育系，玉米自交系京464為保持系，玉米自交系京2416為恢復系，進行三系配套制種，得到雜交種NK718。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：

所述不育系S京464為按照包括如下步驟的方法轉育：

a)玉米不育系S京724做母本，京464做父本雜交，得到雄性不育雜交子代F₁；

b)以所述雄性不育雜交子代F₁為母本、與京464回交，得到雄性不育BC₁代群體；

c)以所述雄性不育BC₁代群體單株為母本、與京464繼續回交，得到京464的雄性不育系。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：

在步驟b)和c)之間，還包括分子鑒定的步驟，所述分子鑒定為用SSR核心引物umc2105k3、bnlg240k1、umc1231k4對所述雄性不育BC₁代群體單株進行PCR擴增，選取擴增圖譜與用同樣引物對所述京464進行PCR擴增得到的圖譜相同的雄性不育BC₁代單株；

所述核心引物umc2105k3是由序列表中序列9所示的單鏈DNA分子和序列表中序列10所示的單鏈DNA分子組成的引物對；

所述核心引物bnlg240k1是由序列表中序列29所示的單鏈DNA分子和序列表中序列30所示的單鏈DNA分子組成的引物對；

所述核心引物umc1231k4是由序列表中序列75所示的單鏈DNA分子和序列表中序列76所示的單鏈DNA分子組成的引物對。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：

在步驟b)和c)之間的分子鑒定前還包括表型鑒定的步驟，所述表型鑒定為選取所述雄性不育BC₁代群體中表型與京464一致的BC₁代單株。

5.根據權利要求2-4中任一所述的方法，其特征在于：

所述不育系S京724為按照包括如下步驟的方法選育：以玉米S型細胞質雄性不育系MD32CGMCC?No.8657為供體、玉米自交系京724為受體，進行回交轉育，得到京724的雄性不育系S京724。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述回交次數為3次；

所述回交轉育具體包括如下步驟：

1)以玉米雄性不育系MD32CGMCC?No.8657為供體、玉米自交系京724為受體，雜交，得到雄性不育雜交子代F₁；

2)以雄性不育雜交子代F₁為母本、與京724回交，得到雄性不育BC₁代群體；

3)以雄性不育BC₁代單株為母本、與京724繼續回交，得到雄性不育BC₂代群體；

4)以雄性不育BC₂代單株為母本、與京724繼續回交，得到京724的雄性不育系S京724。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：在步驟2)和步驟3)之間，還包括如下分子鑒定的步驟：從所述雄性不育BC₁代群體中選取與所述玉米京724遺傳相似度在92.5-95％的雄性不育BC₁代單株。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：在所述分子鑒定前還包括如下步驟：從所述雄性不育BC₁代群體中選取表型與所述玉米京724一致的雄性不育BC₁代單株；

在步驟3)和步驟4)之間，還具體包括如下分子鑒定的步驟：從所述雄性不育BC₂代群體中選取與所述玉米京724遺傳相似度在98.75％-100％的雄性不育BC₂代單株；

在所述分子鑒定前還具體包括如下步驟：從所述雄性不育BC₂代群體中選取表型與所述玉米京724一致的雄性不育BC₂代單株。