[發明專利]利用微藻發酵生產生物柴油的方法

在審

• 申請號: 201410491854.4
• 申請日: 2015-08-04
• 公開（公告）號: CN104498544A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 楊鐘華
• 申請（專利權）人: 瑞安市普羅生物科技有限公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12R1/885;C12R1/845;C12R1/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，包括如下步驟：

(1)微藻培養；

(2)將上述培養的微藻進行發酵，發酵菌為哈茨木霉菌和根霉菌，發酵培養基為，微藻20-30g/L，檸檬酸鈉3-5g/L，鄰甲苯胺1.5-2.5g/L，氯化鈉10-15g/L，磷酸二氫鉀0.5-1g/L，硫酸鎂3-5g/L；

(3)將發酵產物進行油脂的提取；

(4)將上述油脂進行酶催化反應。

2.如權利要求1所述的利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，所述微藻為小球微藻或綠色巴夫藻。

3.如權利要求1或2所述的利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，所述微藻的接種密度為0.4-0.5，所述微藻的培養溫度為28℃，所述微藻的培養光照為35001x。

4.如權利要求1或2所述的利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，所述發酵溫度為30-32℃，所述發酵時間為2-3天。

5.如權利要求1或2所述的利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，所述發酵的接種量為5-10％。

6.如權利要求1或2所述的利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，所述發酵的pH值為5-6。

7.如權利要求1或2所述的利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，所述哈茨木霉菌為哈茨木霉菌Trichoderma?harzianum，保藏編號為CCTCC?NO：M?2010119，所述根霉菌為根霉Rhizopus，保藏編號為CCTCC?NO：M?209007。

8.如權利要求1或2所述的利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，所述發酵培養基的配方為，微藻25-30g/L，檸檬酸鈉4-5g/L，鄰甲苯胺1.5-2.0g/L，氯化鈉10-12g/L，磷酸二氫鉀0.5-1g/L，硫酸鎂3-4g/L。

9.如權利要求1或2所述的利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，所述步驟(3)中，將發酵產物進行油脂的提取，步驟是，將發酵產物用氯仿和甲醇進行提取，發酵產物∶氯仿∶甲醇的體積比為1-2∶1∶1-2，混勻靜置2-3h，收集上清液，加入氯仿和甲醇，使上清液∶氯仿∶甲醇的比例為1-2∶2∶1-2，收集下層氯仿層，并于60℃蒸去氯仿，得油脂。

10.如權利要求1或2所述的利用微藻發酵生產生物柴油的方法，其特征是，所述步驟(4)中，將上述油脂進行酶催化反應的步驟是，將步驟(3)中所得油脂加入甲醇和脂肪酶，脂肪酶添加量為油脂重量的20-30％，35-40℃反應40-50h，得生物柴油，所述甲醇和脂肪酶的重量配比為1-2∶1。