[發明專利]一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液及其應用

在審

• 申請號: 201410491384.1
• 申請日: 2014-09-23
• 公開（公告）號: CN104312939A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發明（設計）人: 關麗;方清平
• 申請（專利權）人: 青島康和食品有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/42
• 代理公司: 北京紐盟知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11456
• 代理人: 許玉順

技術領域

本發明為微生物領域，特別涉及一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液及其應用。

背景技術

沙門氏菌病的病原體。屬腸桿菌科，革蘭氏陰性腸道桿菌。已發現的近一千種(或菌株)。按其抗原成分，可沙門氏菌分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌組。其中與人體疾病有關的主要有甲組的副傷寒甲桿菌，乙組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌，丙組的副傷寒丙桿菌和豬霍亂桿菌，丁組的傷寒桿菌和腸炎桿菌等。除傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌和副傷寒乙桿菌引起人類的疾病外，大多數僅能目引起家畜、鼠類和禽類等動物的疾病，但有時也可污染人類的食物而引起食物中毒。沙門氏菌在水中不易繁殖，但可生存2-3周，冰箱中可生存3-4個月，在自然環境的糞便中可存活1-2個月。沙門氏菌最適繁殖溫度為37℃，在20℃以上即能大量繁殖，因此，低溫儲存食品是一項重要預防措施。

志賀氏菌屬是一類革蘭氏陰性桿菌，是人類細菌性痢疾最為常見的病原菌，通稱痢疾桿菌。大小為0.5～0.7×2～3μm，無芽孢，無莢膜，無鞭毛。多數有菌毛。革蘭氏陰性桿菌。為兼性厭氧菌，能在普通培養基上生長，形成中等大小，半透明的光滑型菌落。在腸道桿菌選擇性培養基上形成無色菌落。生化反應分解葡萄糖，產酸不產氣。VP試驗陰性，不分解尿素，不形成硫化氫，不能利用枸櫞酸鹽作為碳源。宋內氏志賀氏菌能遲緩發酵乳糖(37℃3～4天)。

培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料，一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養和鑒定。培養基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后，易被細菌污染或分解變質，因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基)，較長時間的貯存，必須放在3～6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管，現在均改制成粉末。

培養基根據化學分類為天然培養基、組合培養基和半組合培養基；根據物理分類為液體培養基、固定培養基和脫水培養基；根據微生物分類為選擇性培養基、鑒別培養基。

發明內容

本發明克服現有技術中的不足，提供一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液及其應用。

本發明運用生物化學，微生物學及無機、有機、分析化學和熒光技術的原理，對不同的碳源、氮源、無機鹽類、維生素、生長促進劑等諸類營養組分的組合進行篩選，對培養基的pH值、離子強度、氧化-還原電勢、表面張力、氣體環境等物化因子進行了比較，研究出了本發明的培養基。

本發明所采用的技術方案為：

一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液，所述培養基的組分包括21g/LGN增菌液、4.0g/L乳糖、5.0g/L亞硒酸氫鈉、7.55g/L磷酸氫二鈉、4.5g/L?L-胱氨酸、4.5g/L丙二酸鈉、2.9g/L磷酸二氫鈉，pH值為7.0-7.2。

在以上方案的基礎上，所述GN增菌液為每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20.0g、葡萄糖2.0g、磷酸氫二鉀1.5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉5.8g、去氧膽酸鈉0.33g、氯化鈉5.0g、磷酸氫二鉀2.0g。

本發明還公開了所述的亞硒酸鹽胱氨酸增菌液的應用，用于增殖標本中的沙門氏菌。

蛋白胨提供碳源和氮源滿足細菌生長的需求；乳糖是可發酵的糖類；亞硒酸氫鈉抑制革蘭氏陽性菌和非沙門氏菌的大多數革蘭氏陰性腸道菌；磷酸鹽是緩沖劑；L-胱氨酸為還原劑。

稱取本品28g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，待冷至60℃，傾入無菌平皿。無需高壓滅菌。

本發明的有益效果：

1、培養基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應用；

2、菌生長迅速，變異率低；

3、便于觀察，分析。

具體實施方式

實施例1：

一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液，所述培養基的組分包括21g/LGN增菌液、4.0g/L乳糖、5.0g/L亞硒酸氫鈉、7.55g/L磷酸氫二鈉、4.5g/L?L-胱氨酸、4.5g/L丙二酸鈉、2.9g/L磷酸二氫鈉，pH值為7.0-7.2。

所述GN增菌液為每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20.0g、葡萄糖2.0g、磷酸氫二鉀1.5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉5.8g、去氧膽酸鈉0.33g、氯化鈉5.0g、磷酸氫二鉀2.0g。

蛋白胨提供碳源和氮源滿足細菌生長的需求；乳糖是可發酵的糖類；亞硒酸氫鈉抑制革蘭氏陽性菌和非沙門氏菌的大多數革蘭氏陰性腸道菌；磷酸鹽是緩沖劑；L-胱氨酸為還原劑。