[發明專利]離子交聯法制備殼聚糖-負電性抗生素納米粒及其抑菌活性

在審

• 申請號: 201410489772.6
• 申請日: 2014-09-22
• 公開（公告）號: CN104784120A
• 公開（公告）日: 2015-07-22
• 發明（設計）人: 姜虎林;邢磊;何玉靜;崔朋飛;黃煒珺
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: A61K9/14
• 分類號: A61K9/14;A61K9/08;A61K47/36;A61K45/00;A61K38/10;A61P31/04
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技術領域

本發明涉及納米技術和抗生素遞送領域，特別是涉及抗生素納米顆粒的制備，來用于抗生素可控釋放系統和抑菌活性。

背景技術

負電性抗生素是在水溶液中電離后出現負電荷基團的一類抗生素，其主要含有羧酸、磷酸、磺酸等基團，包括達托霉素，磷霉素，多粘菌素E甲磺酸鈉，安福霉素，頭孢尼西，黃霉素等。在此，以達托霉素作為主要的研究對象。

達托霉素是自鏈霉菌發酵液中提取得到的一種全新結構的環脂肽類抗生素，它對高耐藥性菌株引起的臨床癥狀具有顯著的效果。2003年底，美國食品與藥物管理局(FDA)批準注射用達托霉素用于治療一些革蘭氏陽性菌引起的并發性皮膚及皮膚結構感染，如膿腫、手術切口感染和皮膚潰瘍，以及金黃色葡萄球菌引起的菌血癥。2006年，批準達托霉素用于治療感染性心內膜炎。達托霉素除了能作用于大多數臨床相關革蘭氏陽性菌外，更重要的是它在體外對已呈現甲氧西林(methicillin)、萬古霉素和利奈唑烷等耐藥性質的分離菌株具有強力活性。達托霉素的作用機制與其他抗生素不同，它是通過擾亂細胞膜對氨基酸的轉運，從而阻礙細菌細胞壁肽聚糖的生物合成，改變細胞質膜的性質；另外，它還能通過破壞細菌的細胞膜，使其內容物外泄而達到殺菌的目的，因此細菌對達托霉素產生耐藥性可能會比較困難。達托霉素具有有效的體外和體內殺菌活性，以對抗造成嚴重且威脅生命疾病的臨床相關革蘭氏陽性細菌。

2010年7月29日，FDA稱就診療過程中使用靜脈內注射藥物達托霉素(daptomycin，Cubist制藥公司生產，商品名Cubicin)可能引起嗜酸細胞性肺炎的問題。

利用生物大分子材料來制備納米藥物載體，希望能夠既滿足對藥物輸送的要求，又減弱對生物體的毒副作用。用于納米藥物載體中的生物大分子主要包含蛋白質和多糖(如殼聚糖)兩大類。由于這些大分子都可以從自然界的動植物中獲得，來源豐富，同時也是一種可再生資源，它們具有良好的生物體親合性，排斥?反應小，而且能被生物體內的酶降解，降解后的產物對生物體的毒副作用也較小，另外這些大分子的分子鏈上常常帶有羥基、氨基、羧基等大量可以反應的官能團，可以作為化學修飾的位點，因此它們作為藥物的載體材料具有非常廣闊的應用前景。

殼聚糖是甲殼素通過強堿水解或酶解后脫去乙酰基得到的多糖，化學名為聚(1，4)-2-氨基-2-脫氧-β-D-葡萄糖。殼聚糖的生物相容性好，有促吸收作用，且對人體無毒，也不會對環境產生二次污染，因此，在各方面有廣泛的應用。另外，殼聚糖可以被體內多種酶生物降解，降解產物無毒而且能被生物體完全吸收，因此，是藥物緩釋的理想載體，近年來，作為藥物載體材料，殼聚糖受到了很大的關注。

發明內容

本發明的目的在于提供一種有效地遞送負電性抗生素的納米制劑。本發明通過離子交聯法制備殼聚糖-負電性抗生素納米顆粒能有效地控釋藥物且具有相當的抑菌活性。

本發明進一步的目的在于提供一種用來有效地進行負電性抗生素遞送的生物相容性的聚合物，從而減少其副作用。

上述以及其他目的是通過一種天然陽離子多糖來實現的，其中所述的聚合物是殼聚糖(分子量1k-500kDa)。此外，該聚合物殼聚糖能溶于弱酸性溶液，且帶有大量正電荷，因此它很容易與帶有負電荷的分子在水相條件下作用而制成納米粒。本發明主要使用離子交聯法制備殼聚糖-負電性抗生素納米粒。該方法可以解決藥物吸收難、毒性和不穩定等問題，同時具有緩控釋作用和增加靶向性等優點。

本發明是通過以下的技術方案實現的，具體步驟如下：

殼聚糖-負電性抗生素納米粒的制備方法如下：稱取一定量的殼聚糖，溶于醋酸-醋酸鈉緩沖液中，配成一定濃度的殼聚糖溶液，用1mol/LNaOH溶液調節pH至5.0。另稱取一定量的負電性抗生素溶于蒸餾水中配成一定濃度的負電性抗生素水溶液。在磁力攪拌條件下將負電性抗生素水溶液緩慢滴加到上述殼聚糖溶液中，繼續攪拌30min，用0.8μm微孔濾膜過濾，即得殼聚糖-負電性抗生素納米粒。用MWCO＝3500透析袋進行透析除去未包裹的藥物。最后納米粒凍干或?保存在4℃下備用。

本發明具有如下的有益效果：本發明制備的基于離子交聯法的殼聚糖-負電性抗生素納米粒能有效地控釋藥物，并且具有相當的抑菌活性，在抗生素遞送領域具有廣闊的應用前景。

附圖說明

圖1是本發明按照實施例1合成的殼聚糖-達托霉素納米粒外觀照片和粒徑分布；

圖2是本發明按照實施例1制備的殼聚糖-達托霉素納米粒在不同pH條件下釋放曲線；