[發(fā)明專利]一種用于蛋白質(zhì)分離的WCX/HIC雙功能混合模式聚合物基質(zhì)色譜固定相及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410489339.2
• 申請(qǐng)日: 2014-09-24
• 公開（公告）號(hào): CN104289209A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 白泉;楊帆
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西北大學(xué)
• 主分類號(hào): B01J20/286
• 分類號(hào): B01J20/286;B01J20/30;C07K1/20;C07K1/18
• 代理公司: 西安西達(dá)專利代理有限責(zé)任公司 61202
• 代理人: 謝鋼

1.結(jié)構(gòu)式（I）所示的疏水/弱陽(yáng)離子交換混合模式色譜固定相，

其中為聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯，

R₁為或-(CH₂)_n-,?n為1～3的整數(shù)；

R₂為，或-(CH₂)_n-，n為1～3的整數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的色譜固定相，其特征在于結(jié)構(gòu)式（I）為：

。

3.權(quán)利要求1所述色譜固定相的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）將聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯P_GMA/EDMA分散在硫酸溶液中得到環(huán)氧基水解成鄰二醇的聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯微球；

（2）將步驟（1）制備的水解聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯微球分散于二氧六環(huán)中，加入三氟化硼乙醚和環(huán)氧氯丙烷，反應(yīng)得到含有氯基團(tuán)的聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯微球；

（3）將步驟（2）制備的含氯基團(tuán)的聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯微球分散于乙醇中，加入硫脲進(jìn)一步反應(yīng)得到含巰基的聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯微球；

（4）將步驟（3）制備的含巰基的聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯微球分散于甲苯中，加入相應(yīng)的有機(jī)酸或酸酐和過氧化苯甲酰反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)洗凈得到疏水/弱陽(yáng)離子交換混合模式聚合物基質(zhì)色譜固定相。

4.權(quán)利要求2所述色譜固定相的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）取一份重量的聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯P_GMA/EDMA微球分散于0.1?mol/L硫酸中，60?°C下攪拌10小時(shí)，然后分別用蒸餾水和甲醇洗滌至中性并于50?°C下真空干燥5小時(shí)；

（2）將步驟（1）制備的水解P_GMA/EDMA微球分散于一份體積的二氧六環(huán)中，加入1/60體積的三氟化硼乙醚和1.5倍微球質(zhì)量的環(huán)氧氯丙烷，80°C下攪拌3小時(shí)，然后用乙醇及甲醇各洗滌三遍并于50?°C下真空干燥5小時(shí)，即得含氯基團(tuán)的微球；

（3）將步驟（2）制備的含氯基團(tuán)的微球分散于乙醇中，加入0.3倍微球重量的硫脲，75°C下攪拌3小時(shí)，再加入相同體積10%的NaOH溶液，75°C下攪拌2小時(shí)，然后依次用蒸餾水、1mmol/L的鹽酸、蒸餾水和甲醇洗滌三遍，50?°C下真空干燥5小時(shí)，即得含巰基的微球；

（4）將步驟（3）制備的含巰基的微球分散于甲苯中，加入0.2倍微球重量的馬來酸酐和少量過氧化苯甲酰，通氮?dú)?0分鐘后在70°C下攪拌2小時(shí)；將產(chǎn)物用丙酮洗滌三遍，在0.1mol/L的NaOH溶液中攪拌10小時(shí)，然后依次蒸餾水和甲醇洗滌三遍，50?°C下真空干燥5小時(shí)，即得所述的弱陽(yáng)離子交換/疏水混合模式色譜固定相，

。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述色譜固定相制備方法，其特征在于：步驟（1）中所用的聚甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯微球P_GMA/EDMA，其粒徑為3～40μm，孔徑為150～1000?，交聯(lián)劑為甲基丙烯酸乙二醇酯，交聯(lián)度為40~50%。