[發明專利]一種免清洗的長時間細胞膜熒光成像試劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201410487271.4
• 申請日: 2014-09-22
• 公開（公告）號: CN104288787B
• 公開（公告）日: 2017-06-09
• 發明（設計）人: 吳富根;王宏銀;陳戰
• 申請（專利權）人: 東南大學
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙)32204
• 代理人: 沈振濤

1.一種免清洗的長時間細胞膜熒光成像試劑，其特征在于：所述試劑為側鏈含有膜錨定單元和低效率熒光單元的乙二醇殼聚糖，其中，膜錨定單元由疏水單元和聚乙二醇高分子組成，疏水單元通過聚乙二醇高分子鏈接到乙二醇殼聚糖的氨基上；低效率熒光單元是在水溶液中發光效率低，而在疏水性環境中發光強度大的熒光分子。

2.根據權利要求1所述的一種免清洗的長時間細胞膜熒光成像試劑，其特征在于：所述膜錨定單元占乙二醇殼聚糖重復單元數的百分比在5％到30％；所述低效率熒光單元占乙二醇殼聚糖重復單元數的百分比在1％到5％。

3.根據權利要求1所述的一種免清洗的長時間細胞膜熒光成像試劑，其特征在于：所述乙二醇殼聚糖的分子量為10000-100000。

4.根據權利要求1所述的一種免清洗的長時間細胞膜熒光成像試劑，其特征在于：所述膜錨定單元包括膽固醇、磷脂分子、烷烴和維生素E；所述疏水單元通過聚乙二醇高分子鏈接到乙二醇殼聚糖的氨基上，所述聚乙二醇高分子分子量在500以上。

5.根據權利要求1所述的一種免清洗的長時間細胞膜熒光成像試劑，其特征在于：所述低效率熒光單元為羧基化的尼羅紅染料或羧基化的四苯基乙烯，其通過與氨基反應直接鏈接到乙二醇殼聚糖上，或通過短鏈PEG鏈接到乙二醇殼聚糖的氨基上。

6.一種免清洗的長時間細胞膜熒光成像試劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)取膜錨定單元和乙二醇殼聚糖分別溶于PBS緩沖液中，混勻，室溫反應；產物透析、凍干；

(2)在1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽和N-羥基硫代琥珀酰亞胺存在下，產物和低效率熒光單元分子室溫反應，純化即得；其中，所述低效率熒光單元是在水溶液中發光效率低，而在疏水性環境中發光強度大的熒光分子。