[發明專利]一種T淋巴細胞免疫分型的方法和試劑盒有效
| 申請號: | 201410486072.1 | 申請日: | 2014-09-22 |
| 公開(公告)號: | CN104360049A | 公開(公告)日: | 2015-02-18 |
| 發明(設計)人: | 趙曉東;周麗娜 | 申請(專利權)人: | 重慶醫科大學附屬兒童醫院 |
| 主分類號: | G01N33/53 | 分類號: | G01N33/53 |
| 代理公司: | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人: | 趙青朵 |
| 地址: | 400014 *** | 國省代碼: | 重慶;85 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 淋巴細胞 免疫 方法 試劑盒 | ||
1.一種T淋巴細胞免疫分型的方法,其特征在于,包括:
取不同的熒光標記的抗體,與待檢測樣品混合,孵育后,經流式細胞術檢測,得檢測數據,分析所述檢測數據;
所述抗體包括:
抗TCRαβ的抗體、抗TCRγδ的抗體、抗CD3的抗體、抗CD4的抗體、抗CD8的抗體、抗CD27的抗體和抗CD45RA抗體;
所述分析的方法包括:
細胞表面標志CD3+TCRαβ+CD4-CD8-代表TCRαβ+雙陰性T細胞;
細胞表面標志CD3+TCRγδ+代表γδT細胞;
細胞表面標志CD3+CD4+CD45RA+CD27+代表輔助初始T細胞;
細胞表面標志CD3+CD4+CD45RA+CD27-代表輔助耗竭T細胞;
細胞表面標志CD3+CD4+CD45RA-CD27+代表輔助中心記憶T細胞;
細胞表面標志CD3+CD4+CD45RA-CD27-代表輔助效應記憶T細胞;
細胞表面標志CD3+CD8+CD45RA+CD27+代表細胞毒性初始T細胞;
細胞表面標志CD3+CD8+CD45RA+CD27-代表細胞毒性耗竭T細胞;
細胞表面標志CD8+CD45RA-CD27+代表細胞毒性中心記憶T細胞;
細胞表面標志CD3+CD8+CD45RA-CD27-代表細胞毒性效應記憶T細胞。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,還包括統計所述待測樣品中T淋巴細胞數目的步驟,包括:
檢測所述待測樣品中淋巴細胞的總數;
檢測所述待測樣品中T淋巴細胞占所述淋巴細胞的百分比;
通過計算,即得所述待測樣品中T淋巴細胞的數目。
3.一種淋巴細胞免疫分型的方法,其特征在于,其包括如權利要求1或2所述的T淋巴細胞免疫分型的步驟。
4.一種用于T淋巴細胞免疫分型的試劑盒,其特征在于,包括如下不同的熒光標記的抗體:
抗TCRαβ的抗體、抗TCRγδ的抗體、抗CD3的抗體、抗CD4的抗體、抗CD8的抗體、抗CD27的抗體和抗CD45RA抗體。
5.根據權利要求4所述的試劑盒,其特征在于,所述抗TCRαβ的抗體的熒光標記為PE。
6.根據權利要求4或5所述的試劑盒,其特征在于,所述抗TCRγδ的抗體的熒光標記為BV421或FITC。
7.根據權利要求4至6中任一項所述的試劑盒,其特征在于,所述抗CD3的抗體的熒光標記為Percp-cy5.5或Pacific?blue。
8.根據權利要求4至7中任一項所述的試劑盒,其特征在于,所述抗CD4的抗體的熒光標記為FITC或APC-Cy7。
9.根據權利要求4至8中任一項所述的試劑盒,其特征在于,所述抗CD8的抗體的熒光標記為BV510。
10.一種用于淋巴細胞免疫分型的試劑盒,其特征在于,其包括如下不同的熒光標記的抗體:
抗TCRαβ的抗體、抗TCRγδ的抗體、抗CD3的抗體、抗CD4的抗體、抗CD8的抗體、抗CD27的抗體和抗CD45RA抗體。
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