[發明專利]一種高密度發酵枯草芽孢桿菌的方法在審
| 申請號: | 201410485671.1 | 申請日: | 2014-09-23 |
| 公開(公告)號: | CN104293702A | 公開(公告)日: | 2015-01-21 |
| 發明(設計)人: | 孫義 | 申請(專利權)人: | 領綠生物鎮江有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12R1/125 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 212211 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高密度 發酵 枯草 芽孢 桿菌 方法 | ||
技術領域
本發明屬于農業應用微生物技術領域。
背景技術
目前我國水產養殖業主要以高密度養殖為主,因此養殖戶面臨著一方面為了追求高產量而不斷加大飼料投放量,一方面由于大量殘餌、養殖動物糞便排放過多而造成水體的氨氮及亞硝酸鹽升高影響魚蝦個體大小和產量的矛盾。目前市場上農用枯草芽孢桿菌產品質量參差不齊,急需提高枯草芽孢桿菌的發酵水平。
發明內容
技術問題
本發明的目的是提供“一種高密度發酵枯草芽孢桿菌的方法”,提高了產品的菌含量,降低了養殖戶的使用成本。
技術方案
本發明所述的一種高密度發酵枯草芽孢桿菌的方法,其步驟如下:?
(1)將活化好的枯草芽孢桿菌按5%-10%的接種量接種到培養基中進行搖床培養,該培養基為:蔗糖15-20g/l、蛋白胨3-5g/l、氯化鈉5-10g/l、PH=7.0-7.2。培養條件為:150-200r/min、溫度為35-37度、通氣量為1:1;培養24-48小時;
(2)將椰子殼粉碎成30-60目的粉狀,用自來水按1:1的比例浸泡12-24小時;
(3)將浸泡好的椰子殼、麩皮、豆粕粉按(1-2):(2-5):(2-5)的比例進行混勻,配成固體培養基,高溫滅菌,滅菌溫度為80~121度,滅菌時間為0.5~1小時,然后冷卻至30~40度后,將步驟1的枯草芽孢桿菌液體在無菌條件下接種到固體培養基中,混勻,然后置30-40度溫度下進行通氣培養,培養時間為24~48小時;
(4)將步驟3培養好的固體芽孢菌進行烘干,烘干溫度為45~60度,然后進行粉碎,即得高密度枯草芽孢桿菌粉劑;菌含量大于等于1011cfu/g。
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?具體實施方式:
?實施例1:
(1)將活化好的枯草芽孢桿菌按10%的接種量接種到培養基中進行搖床培養,該培養基為:蔗糖20g/l、蛋白胨5g/l、氯化鈉10g/l、PH=7.0。培養條件為:1200r/min、溫度為37度、通氣量為1:1;培養24小時;
(2)將椰子殼粉碎成60目的粉狀,用自來水按1:1的比例浸泡12小時;
(3)將浸泡好的椰子殼、麩皮、豆粕粉按1:3:2的比例進行混勻,配成固體培養基,高溫滅菌,滅菌溫度為121度,滅菌時間為0.5小時,然后冷卻至40度后,將步驟1的枯草芽孢桿菌液體在無菌條件下接種到固體培養基中,混勻,然后置34度溫度下進行通氣培養,培養時間為36小時;
(4)將步驟3培養好的固體芽孢菌進行烘干,烘干溫度為60度,然后進行粉碎,即得高密度枯草芽孢桿菌粉劑;菌含量為3.4×1011cfu/g。
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