[發明專利]一株核桃內生菌及其應用

有效

• 申請號: 201410469787.6
• 申請日: 2014-09-06
• 公開（公告）號: CN104593284B
• 公開（公告）日: 2017-10-10
• 發明（設計）人: 王美琴;胡春艷;趙立娟;張紅娟;吳紅玉;郝曉娟;劉慧平;韓巨才
• 申請（專利權）人: 山西農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于應用微生物技術領域，具體涉及一株核桃內生菌及其應用。

背景技術

一直以來，植物病蟲害是威脅農業生產的主要禍手之一。化學藥劑由于其見效快、成本低、使用方便等特點而自上世紀七十年代以來，被人們大量使用，雖然對農作物的產量提高具有重大的作用。但隨著社會經濟的增長，人們逐漸意識到長期大量使用農藥帶來的一系列問題：首先殺傷害蟲天敵，土壤中微生物的種群減少，破壞了生態平衡；其次由于常年使用，使病原菌與害蟲產生了抗藥性，防治成本加大、防效降低；還有農藥的殘留問題，一方面導致生態環境惡化，另一方面食物中存在的農藥殘留最終威脅到人類的健康。因此在倡導環保和農業可持續性發展的今天，高效低毒低殘留、與環境相容性好的生物制劑的開發與應用已成為農藥界和植保界人士研究的熱點。

目前篩選生防菌及其利用其發酵產物來防治植物病蟲害是生防途徑之一，生防菌通過直接抑制病原菌的生長或與其競爭生存空間，提高植株抗病蟲能力等而達到防病蟲害的目的。自Weindling在1932年首次發現木霉菌對植物病原真菌的抑制作用以來，植病生防研究取得了較大的進展，現已篩選出大量的生防菌，并開發出多種生物制劑。但有關的生防菌株大多是從土壤、植物根際或體表分離的，室內測定具有拮抗作用的菌株，室外施用時大多不能在寄主體表或體內正常定殖，同時受環境條件變化和不同生態條件下植物根圍微生物種群變化等因素影響，致使其生防效果不穩定，有時甚至無效。

植物內生菌以其占據有利的生態位，不易受環境條件的影響，能夠很好定殖于植株的相應部位，抵抗病蟲害入侵等獨有的優勢，成為植物病蟲害生物防治的潛在資源菌。因此研究和利用內生菌對于替代或減少農藥與化肥的使用，改善農業生態系，保持植物微生態系統的生物多樣性，維護農田生態平衡，實現農業可持續發展都具有重要意義。

植物內生細菌是能夠定殖在健康植物組織內，并與植物建立了和諧聯合關系的一類微生物。目前，已經從多種植物體內分離篩選出具有生防作用的內生拮抗細菌。其中芽胞桿菌是主要類群之一，由于其芽胞具有耐熱、抗逆等特點，易于加工制劑及度過不良環境而受到人們的重視。據報道馬英元等(甜菜白粉病內生拮抗細菌的篩選鑒定及其防治效果的研究[J].植物保護，2011，37(2)：25-30)從高抗白粉病的甜瓜品種植株內篩選出對甜瓜白粉病(Sphaerotheca fuliginea)有較好防效的內生枯草芽胞桿菌，張寶俊等(內生解淀粉芽胞桿菌 LP-5抗菌蛋白的分離純化及特性[J].植物保護學報，2010(2)：143-147)從梨樹枝條中篩選出對梨黑斑病具有拮抗作用的內生解淀粉芽胞桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)，歐雄常等(拮抗辣椒疫病菌的紅樹內生細菌篩選及RS261菌株鑒定[J].微生物學通報，2009，36(2)：175-180)從紅樹內分離篩選出對辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)有較好拮抗作用的內生解淀粉芽胞桿菌RS261。竇瑞木等(透骨草內生細菌生理生化特性及抑菌效果研究[J].河南農業科學，2008，5：79-81)從中草藥透骨草中篩選出對灰霉菌(Botrytis cinerea)有抑制作用的內生枯草芽孢桿菌。

由膠孢炭疽菌(Gloeosporium fructigenum Berk.)引起的核桃炭疽病是危害核桃果實和葉片的重要病害，據報道分布在我國多個核桃產區，造成落果落葉，對核桃產量和品種造成重要的影響。本專利以核桃炭疽病菌(Gloeosporium fructigenum Berk.)作為目標菌，從核桃的青皮中分離篩選具有抑菌作用的核桃內生菌株。并對其分類地位、抑菌效果和發酵條件的優化配方等進行了系統研究，為進一步開發研制生防制劑提供菌株來源。

對核桃炭疽病化學防治的藥劑生產上常用銅制劑、有機硫類、苯并咪唑類等，特別是苯并咪唑類殺菌劑應用較多。如劉霞等(8種殺菌劑對核桃炭疽病病原菌膠孢炭疽菌的室內毒力[J].農藥學學報，2013，15(4)：412-420)通過室內篩選，建議在生產中防治核桃炭疽病的化學藥劑有咪鮮胺(prochloraz)、戊唑醇(tebuconazole)、三唑酮(triadimefon)、代森錳鋅(mancozeb)和異菌脲(iprodione)。但是如果長期和頻繁地使用某類殺菌劑，易導致抗藥性的產生，防治效果下降，成本上升，并且污染環境，殺傷天敵，破壞生態平衡，且農藥殘留影響果品，直接危險到人類的健康。