[發明專利]一種金粟蘭再生植株的快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201410463269.3
• 申請日: 2014-09-12
• 公開（公告）號: CN104255483A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 楊存
• 申請（專利權）人: 南京通澤農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及植物組織培養的快繁方法，屬于植物技術領域。

背景技術

金粟蘭，Chloranthus?spicatus，金粟蘭科，又名：珠蘭、魚子蘭、茶蘭等，半灌木，老株基部稍木質化，莖直立稍披散狀，莖節明顯，節上具分枝。葉對生，橢圓形，邊緣有鈍鋸齒，葉面光滑稍呈泡皺狀。穗狀花序頂生。花黃色，有濃郁幽香。花期8-10月。產于云南、四川、貴州、福建、廣東。生于山坡、溝谷密林下，海拔150-990米，但野生者較少見，現各地多為栽培。日本也有栽培。喜溫暖、潮濕和通風的環境。喜陰，忌烈日，要求疏松肥沃、腐殖質豐富、排水良好的土壤。全株入藥，治風濕疼痛、跌打損傷，根狀莖搗爛可治療瘡。有毒，用時宜慎。常用的繁殖方法為分株、扦插和壓條繁殖，組織培養方法可以在短期內獲得大量的懸浮細胞和再生植株，有助于解決金粟蘭種質資源的可持續生長，并且為金粟蘭藥用成分的開發利用提供新的途徑。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種金粟蘭的快速繁殖方法，由該方法所制備得到的金粟蘭成活率高，品質優良，遺傳穩定性好，可以為大田大規模種植提供種苗。

本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的：

選用金粟蘭幼嫩的葉片，用洗潔精浸泡三分鐘，自來水沖洗20分鐘，在超凈工作臺上用1％的碘化鉀消毒7.5分鐘，無菌水沖洗?4-5?次，在超凈工作臺上研磨成勻漿，使其組織破碎，400目紗布過濾，接種入液體培養基MS+6-BA0.2~0.5?mg/L+2,4-D0.5~1mg/L上進行懸浮細胞培養，45天后，120目紗布過濾入分化培養基MS+NAA0.1~0.3mg/L+?6-BA1～2mg/L+750mg/L硫酸鎂上誘導愈傷組織分化，進行植株再生培養，培養條件為溫度25℃，濕度60%-70%，光照強度4000lx，光期12h/d，待分化出來的幼苗長至2cm左右，取出煉苗移栽。

采用本發明制備的金粟蘭幼苗成活率高，周期短，次生代謝物含量高，能耗少，利于大規模種植。

下面將結合具體實施方式對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1

選用金粟蘭幼嫩的葉片，用洗潔精浸泡三分鐘，自來水沖洗20分鐘，在超凈工作臺上用1％的碘化鉀消毒7.5分鐘，無菌水沖洗?4-5?次，在超凈工作臺上研磨成勻漿，使其組織破碎，400目紗布過濾，接種入液體培養基MS+6-BA0.2?mg/L+2,4-D0.5mg/L上進行懸浮細胞培養，45天后，120目紗布過濾入分化培養基MS+NAA0.1mg/L+?6-BA1mg/L+750mg/L硫酸鎂上誘導愈傷組織分化，進行植株再生培養，培養條件為溫度25℃，濕度60%-70%，光照強度4000lx，光期12h/d，待分化出來的幼苗長至2cm左右，取出煉苗移栽，成活率為87%。

實施例2

選用金粟蘭幼嫩的葉片，用洗潔精浸泡三分鐘，自來水沖洗20分鐘，在超凈工作臺上用1％的碘化鉀消毒7.5分鐘，無菌水沖洗4-5次，在超凈工作臺上研磨成勻漿，使其組織破碎，400目紗布過濾，接種入液體培養基MS+6-BA0.5?mg/L+2,4-D1mg/L上進行懸浮細胞培養，45天后，120目紗布過濾入分化培養基MS+NAA0.3mg/L+?6-BA2mg/L+750mg/L硫酸鎂上誘導愈傷組織分化，進行植株再生培養，培養條件為溫度25℃，濕度60%-70%，光照強度4000lx，光期12h/d，待分化出來的幼苗長至2cm左右，取出煉苗移栽，成活率為88%。

實施例3

選用金粟蘭幼嫩的葉片，用洗潔精浸泡三分鐘，自來水沖洗20分鐘，在超凈工作臺上用1％的碘化鉀消毒7.5分鐘，無菌水沖洗?4-5?次，在超凈工作臺上研磨成勻漿，使其組織破碎，400目紗布過濾，接種入液體培養基MS+6-BA0.3mg/L+2,4-D0.5mg/L上進行懸浮細胞培養，45天后，120目紗布過濾入分化培養基MS+NAA0.2mg/L+?6-BA1mg/L+750mg/L硫酸鎂上誘導愈傷組織分化，進行植株再生培養，培養條件為溫度25℃，濕度60%-70%，光照強度4000lx，光期12h/d，待分化出來的幼苗長至2cm左右，取出煉苗移栽，成活率為86%。