[發明專利]一種莢果蕨懸浮細胞培養的快速繁殖方法在審
| 申請號： | 201410463169.0 | 申請日： | 2014-09-12 |
| 公開（公告）號： | CN104186342A | 公開（公告）日： | 2014-12-10 |
| 發明（設計）人： | 楊存 | 申請（專利權）人： | 南京通澤農業科技有限公司 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 無 | 代理人： | 無 |
| 地址： | 210046 江蘇省南京市*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 莢果 懸浮 細胞培養 快速 繁殖 方法 | ||
1.?一種莢果蕨懸浮細胞培養的快速繁殖方法，包括無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導、懸浮細胞的培養，其主要步驟如下：
（1）取莢果蕨幼嫩的葉片，在超凈工作臺上對其進行消毒處理；
（2）取步驟（1）消毒處理過的葉片接入H+NAA0.2mg/L+6-BA0.2mg/L+頭孢噻腭鈉500?mg/L培養基中進行愈傷組織誘導，附加7.5g/L瓊脂，30g/L蔗糖，150lx，溫度25℃；
（3）取步驟（3）誘導的愈傷組織，選擇生長良好，健壯的愈傷組織，稱取0.3g加入6,7-V+?KT0.5mg/L+2,4-D1mg/L+20-100μg/mL黑曲霉液體培養基中震蕩培養，培養一定時間后，定期取出樣品，過濾出培養物，經蒸餾水沖洗，用濾紙吸干細胞表面水分。
2.?按照權利要求1所述的一種莢果蕨懸浮細胞培養的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（1）中所述莢果蕨無菌葉片的獲得為，取莢果蕨幼嫩葉片，在肥皂水中浸泡15min，流水沖洗15min，超凈工作臺上0.1%氯化汞處理8min，無菌水沖洗5-7遍，吸水紙吸去表面水分。
3.?按照權利要求1所述的一種莢果蕨懸浮細胞培養的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（2）誘導培養基中附加了頭孢噻腭鈉500mg/L，可以消除生長過程中內生菌的出現。
4.?按照權利要求1所述的一種莢果蕨懸浮細胞培養的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（3）懸浮細胞培養中附加了黑曲霉，對細胞生長量和次生代謝物質的含量均有顯著的影響。
5.?按照權利要求1所述的一種莢果蕨懸浮細胞培養的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（3）懸浮細胞培養采用水平震蕩培養，震蕩速度120r/min，每50ml細胞懸浮液裝入100ml三角瓶中培養，溫度28℃，光照1000lx。
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