[發明專利]一種吳茱萸誘變育種的快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201410463159.7
• 申請日: 2014-09-12
• 公開（公告）號: CN104255470A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 楊存
• 申請（專利權）人: 南京通澤農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種吳茱萸的快速繁殖方法，屬于生物技術領域。

背景技術

吳茱萸，蕓香科，別名吳萸、茶辣、漆辣子、臭辣子樹等，Tetradium?ruticarpum，小喬木或灌木，產秦嶺以南各地，但海南未見有自然分布，曾引進栽培，均生長不良。生于平地至海拔1500米山地疏林或灌木叢中，多見于向陽坡地。各地有小或大量栽種。吳茱萸對土壤要求不嚴，一般山坡地、平原、房前屋后、路旁均可種植。中性，微堿性或微酸性的土壤都能生長，但作苗床時尤以土層深厚、較肥沃、排水良好的壤土或砂壤土為佳，低洼積水地不宜種植。是一種藥用植物，治吞酸，陰毒腹痛，疝氣，血痢，喉舌口瘡，現代研究表明對中樞神經系統，消化系統，心血管系統皆有很好的療效。常用的繁殖方式有根插繁殖，枝插繁殖，分蘗繁殖，但繁殖效果不理想，現代組培技術應用于吳茱萸的繁殖尚無人研究，利用組培技術結合誘變劑處理可以提高繁殖效率，提高吳茱萸的品質。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種吳茱萸的組培快速繁殖方法，由該方法所制備可以提高突變頻率，得到豐富的變異體，繁殖率高，生長周期短，次生代謝物成分含量高。

本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的：

取吳茱萸葉片，在流水沖洗3min，毛刷去除便面污垢，超凈工作臺上次氯酸鈉處理14min，無菌水沖洗5遍，吸水紙吸去表面水分，滅菌處理過的吳茱萸葉片接入培養基配方為DCR+NAA0.2mg/L+6-BA0.5mg/L誘導培養基中進行愈傷組織誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗室培養，溫度25℃，誘導出來的愈傷組織30天后轉入附加了乙基半氨酸的培養基中進行右邊處理，誘變后的愈傷組織加入改良DCR+NAA4.8-5.4μm/L+TDZ0.2-0.4μm/L+氯化鈷0.01-0.05μm/L+半乳糖60g/L培養基中進行愈傷組織分化植株再生。

采用本發明試管苗長勢好，誘導率高，周期短，操作可控，可進行工業擴大化生產。

下面將結合具體實施方式對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1

取吳茱萸葉片，在流水沖洗3min，毛刷去除便面污垢，超凈工作臺上次氯酸鈉處理14min，無菌水沖洗5遍，吸水紙吸去表面水分，滅菌處理過的吳茱萸葉片接入培養基配方為DCR+NAA0.2mg/L+6-BA0.5mg/L誘導培養基中進行愈傷組織誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗室培養，溫度25℃，誘導出來的愈傷組織30天后轉入附加了乙基半氨酸的培養基中進行右邊處理，誘變后的愈傷組織加入改良DCR+NAA4.8μm/L+TDZ0.2μm/L+氯化鈷0.01μm/L+半乳糖60g/L培養基中進行愈傷組織分化植株再生，誘導率90%。

實施例2

取吳茱萸葉片，在流水沖洗3min，毛刷去除便面污垢，超凈工作臺上次氯酸鈉處理14min，無菌水沖洗5遍，吸水紙吸去表面水分，滅菌處理過的吳茱萸葉片接入培養基配方為DCR+NAA0.2mg/L+6-BA0.5mg/L誘導培養基中進行愈傷組織誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗室培養，溫度25℃，誘導出來的愈傷組織30天后轉入附加了乙基半氨酸的培養基中進行右邊處理，誘變后的愈傷組織加入改良DCR+NAA5.4μm/L+TDZ0.4μm/L+氯化鈷0.05μm/L+半乳糖60g/L培養基中進行愈傷組織分化植株再生，誘導率91%。

實施例3

取吳茱萸葉片，在流水沖洗3min，毛刷去除便面污垢，超凈工作臺上次氯酸鈉處理14min，無菌水沖洗5遍，吸水紙吸去表面水分，滅菌處理過的吳茱萸葉片接入培養基配方為DCR+NAA0.2mg/L+6-BA0.5mg/L誘導培養基中進行愈傷組織誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗室培養，溫度25℃，誘導出來的愈傷組織30天后轉入附加了乙基半氨酸的培養基中進行右邊處理，誘變后的愈傷組織加入改良DCR+NAA5μm/L+TDZ0.4μm/L+氯化鈷0.01μm/L+半乳糖60g/L培養基中進行愈傷組織分化植株再生，誘導率92%。