[發明專利]一種亮葉冬青的組培快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201410462993.4
• 申請日: 2014-09-12
• 公開（公告）號: CN104255457A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 楊存
• 申請（專利權）人: 南京通澤農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種亮葉冬青的組培快速繁殖方法，屬于生物技術領域。

背景技術

亮葉冬青，Ilex?nitidissima?C.?J.?Tseng，冬青科，常綠小喬木，產于中國江西東北部、湖南南部和廣西東北部及南部，高可達6米；葉片革質，背面具腺點或無，先端尾狀漸尖；花序簇生，雄花序的每個分枝具3花，雌花序的每個分枝具1花，稀具2～5花；花4基數，稀5或6基數；敗育子房球形或墊狀，具短喙；果球形，直徑約5毫米，成熟時，紅色，具隆起的條紋，內果皮革質。果期7～10月。生于海拔960～1250米的山坡密林、疏林或雜木林中。為冬青科植物亮葉冬青的根葉。樹皮含樹脂。功效：涼血解毒、通絡止痛。主治：治熱毒瘡腫、痢疾、跌撲閃挫、瘀血作痛、風濕熱痹。性味歸經：苦、微辛，涼，入心、肝二經，目前主要采用常規栽植，組培方法可以快速獲得大量的亮葉冬青幼苗，保持遺傳性狀的穩定性，克服地域的局限性。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種亮葉冬青的組培快速繁殖方法，由該方法所制備得到的亮葉冬青達到了增殖系數好，成活率高的要求，可以為其產業化生產提供一種周期短的人工培育方法。

本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的：

取亮葉冬青頂芽，剪去多余葉片，保留一小葉，用毛刷去除污垢，加入漂白粉浸泡3分鐘，流水沖洗0.5小時，使用10%安替福民溶液處理6min，無菌水沖洗5-7遍，切去切口，獲得的無菌芽接種入B₅+NAA0.1mg/L+KT0.5mg/L+2，4-D0.1mg/L+300μg/g芐氨進行叢生芽誘導，培養條件采用800lx弱光強下培養，蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH值5.8，溫度25℃，光期8h，暗期16h，誘導出來的亮葉冬青叢生芽轉接于B₅+6-BA1.5mg/L+IBA0.1mg/L進行叢生芽增殖培養，培養條件為光照2000lx，蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH值5.8，溫度27℃，光期12h，暗期12h，增殖的叢生芽處理后接入含1/2?B₅+IBA0.05mg/L+AC1.0g/L的培養基中進行生根誘導，培養條件光照6000lx，光期16h，暗期8h，長約5cm的試管苗取出栽植于伯爵泥巖525^#：蛭石=3：2的基質中，三周后噴施葉面肥，濕度85%，溫度25℃，遮蓋兩層薄膜，透光率保持在35%左右。

采用本發明制備的亮葉冬青組培幼苗生產周期短、繁殖率高，生根率92%。

下面將結合具體實施方式對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1

取亮葉冬青頂芽，剪去多余葉片，保留一小葉，用毛刷去除污垢，加入漂白粉浸泡3分鐘，流水沖洗0.5小時，使用10%安替福民溶液處理6min，無菌水沖洗5-7遍，切去切口，獲得的無菌芽接種入B₅+NAA0.1mg/L+KT0.5mg/L+2，4-D0.1mg/L+300μg/g芐氨進行叢生芽誘導，培養條件采用800lx弱光強下培養，蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH值5.8，溫度25℃，光期8h，暗期16h，誘導出來的亮葉冬青叢生芽轉接于B₅+6-BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L進行叢生芽增殖培養，培養條件為光照2000lx，蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH值5.8，溫度27℃，光期12h，暗期12h，增殖的叢生芽處理后接入含1/2?B₅+IBA0.05mg/L+AC0.5g/L的培養基中進行生根誘導，培養條件光照6000lx，光期16h，暗期8h，長約5cm的試管苗取出栽植于伯爵泥巖525^#：蛭石=3：2的基質中，三周后噴施葉面肥，濕度85%，溫度25℃，遮蓋兩層薄膜，透光率保持在35%左右，生根率為86%。

實施例2