[發明專利]一種通量定量測定菌株降氮能力的方法在審
| 申請號： | 201410460950.2 | 申請日： | 2014-09-11 |
| 公開（公告）號： | CN105400861A | 公開（公告）日： | 2016-03-16 |
| 發明（設計）人： | 胡婷;馬青山;贠錦軍;何增國 | 申請（專利權）人： | 北京大北農科技集團股份有限公司;福建大北農水產科技有限公司;天津昌農科技有限責任公司 |
| 主分類號： | C12Q1/06 | 分類號： | C12Q1/06;C12R1/125 |
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| 地址： | 100086 北京市海*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 通量 定量 測定 菌株 能力 方法 | ||
1.一種通量定量測定菌株降氮能力的方法，其特征在于：將待測菌株菌液接入相應的以粉碎蝦料為唯一碳源的篩選培養基中，振蕩培養后，將培養物離心取上清液，加入96孔板；測定亞硝態氮時，在96孔板中加入待測樣上清液后，每孔先后加入格里斯試劑A、B，于550nm測定吸光值；測定氨氮時每孔加入納氏試劑，于450nm測定吸光值，然后通過建立的標準曲線計算出體系中剩余氮濃度，從而計算出菌株的降氮功效。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，亞硝態氮濃度Y1與測定OD值X1之間參考標準曲線為Y1=3.508X1-0.191；氨氮濃度Y2與測定OD值X2之間參考標準曲線為Y2=14.085X2-0.620。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，待測菌株接種終濃度為5×104-5CFU/mL。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，測定亞硝態氮時，菌株培養物上清液與格里斯試劑A、B的體積比為10:1:1；測定氨氮時，菌株培養物上清液與納氏試劑的體積比為10:1。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，菌株振蕩培養條件為培養28-33℃，150-200r/min，培養24-48h。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的NO2--N由NaNO2提供，亞硝態氮濃度為2.5mg/l；所述的NH4+-N由(NH4)2SO4提供，銨態氮濃度為2.5mg/l。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的粉碎蝦料的濃度為1.0g/L。
8.如權利要求1~7任一項所述的方法，其特征在于，所述的菌株為芽孢桿菌。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述的芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌。
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