[發明專利]從組合物中提取具有孕甾烷母核結構的化合物的方法

有效

• 申請號: 201410457897.0
• 申請日: 2014-09-10
• 公開（公告）號: CN104198609A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發明（設計）人: 周維;蘭昌云;顏波;張吉;譚輝
• 申請（專利權）人: 重慶華邦制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所 11308
• 代理人: 黎昌莉

技術領域

本發明屬于分析化學技術領域，具體涉及從組合物中提取具有孕甾烷母核結構的化合物的方法。

背景技術

腎上腺皮質激素是由腎上腺皮質合成和分泌的甾體激素，具有孕甾烷母核。從腎上腺皮質中可提取出數十種甾醇類結晶。該類化合物主要功能是調節動物體內的水鹽代謝和糖代謝，在各種脊椎動物中普遍存在。約有30種腎上腺皮質激素已被分離和鑒定，其中約10種有生物活性。以皮質醇的活性最強，具有調節糖、蛋白質和脂肪代謝的功能，可影響葡萄糖的合成和利用、脂肪的動員及蛋白質合成。目前，腎上腺皮質激素在藥物中的應用主要包括以下幾類：弱效的有醋酸氫化可的松；中效的有醋酸地塞米松(皮炎平)、丁酸氯倍米松、醋酸曲安奈德(去炎松)、丁酸氫化可的松(尤卓爾)、糠酸莫米松(艾洛松)、醋酸氟氫松；強效的有鹵米松、丙酸倍氯米松、氯氟米松(樂膚液或喜樂)；最強效的有丙酸氯倍他索(特美膚或恩膚霜或皮康王)、鹵美他松(適確得或奧能軟膏)、丁酸氯倍他松(百多邦)、二丙酸倍他米松，等等。該類藥物的衍生結構示意如下：

市場上這些腎上腺皮質激素類藥物廣泛作為局部用藥，用于治療皮膚病，因此產品中含有腎上腺皮質激素成分的組合物應用廣泛。如何快速的從組合物中分離腎上腺皮質激素類化合物及其衍生物(降解雜質)，并順利進行下一步的測試，對產品的生產和貯存，以及市場的抽檢都具有重要的意義。

然而，由于腎上腺皮質激素類藥物種類繁多，不同藥物使用的輔料又不盡相同，一般針對具體的腎上腺皮質激素成分采用不同的提取方法。已有方法通用性差，對于多種類型藥物的提取，就需要準備不同的試劑，進行不同的操作，測試人員容易混淆，而且提取效果差，最嚴重的問題是還會干擾后續的測試。例如：

丁酸氯倍他松乳膏進口注冊標準(JX20070012)，其選取丙酸氯倍他索，加乙醇制成內標溶液。稱取樣品，置具塞錐形瓶中，加內標溶液5ml和乙醇15ml，98-100℃水浴中加熱，充分振搖使乳膏完全溶解，放冷，置冰浴中冷卻1小時以上，取出，離心，過濾取濾液，即得供試溶液。該提取方法于98-100℃水浴加熱丁酸氯倍他松乳膏，溶劑揮發較多，操作繁瑣，不安全；選擇加入內標，不經濟；丁酸氯倍他松在98-100℃水浴加熱，會發生水解，其降解產物如下式所示。此外，一般腎上腺皮質激素化合物含量和有關物質測定使用HPLC測定，乙醇作提取溶劑會有較大的溶劑效應，測定峰形較差。

另有鹵米松乳膏進口注冊標準(JX20010092)，取鹵米松乳膏適量置燒杯中，加四氫呋喃適量，攪拌使溶解搖勻，置冰浴中放置30分鐘，濾過取濾液，作供試液。該提取方法中，使用的四氫呋喃試劑是環醚，容易被空氣氧化，產生一定的雜質，常加入BHT(2，6-二叔丁基對甲本酚)；另外，四氫呋喃將樣品中的基質全部溶解，冰浴時未除去基質，因此，得到的色譜峰基線較差，干擾大，峰形較差，雜質也增多。

另有中國藥典二部2010年版丙酸氯倍他索乳膏含量測定法，加入醋酸氟輕松做內標，用甲醇做溶劑提取測定含量。該方法也加入內標，操作繁瑣，不經濟，基質除去不徹底。

前些年國內外對外用制劑藥品有關物質的研究不夠深入，已有的腎上腺皮質激素類質量分析的文獻中，沒有關于腎上腺皮質激素類藥的有關物質方面提取的文獻。有關物質測定的濃度一般是含量測定的10-100倍，故有關物質測定比含量測定要求更嚴，要求基線噪音對雜質測定無干擾，就對樣品前處理提出了更高的要求。已有的文獻中只是將樣品中的主藥溶解，進行含量測定，不太在意溶解的基質對測定的影響。故采用現有含量測定時提取腎上腺皮質激素類成分的方法，提取其降解物后進行有關物質的測試，測試效果不理想，噪音多、干擾多，導致測試不穩定、不準確。

基于上述原因，本發明探索了一種針對含腎上腺皮質激素成分的組合物進行有效腎上腺皮質激素成分提取，并利于后述測試的方法。

發明內容

有鑒于此，本發明提供一種從組合物中提取具有孕甾烷母核結構的化合物的方法，該方法通用性廣，能有效提取該類化合物并且不會對其產生破壞，所用的溶劑也不會干擾后續的分析檢測。

為實現上述目的，本發明的技術方案為：