[發(fā)明專利]一種豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410457628.4
• 申請(qǐng)日: 2014-09-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104195140A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何鎮(zhèn)東;褚武英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 長(zhǎng)沙美日生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;A23K1/18
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明涉及一種肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑，具體是一種具有抑制豬體內(nèi)肌肉生長(zhǎng)抑制素(myostatin，MSTN)表達(dá)的化學(xué)合成劑，其在豬肌肉生長(zhǎng)中起促進(jìn)作用。

背景技術(shù)

肌肉生成抑制素(myostatin，MSTN)，又稱生長(zhǎng)分化因子8?(?growth?differentiation?factor?8，GDF8)，是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(?transforming?growthfactor?β，TGF-β)?超家族成員。大量實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明，MSTN?基因是一種對(duì)骨骼肌生長(zhǎng)具有負(fù)調(diào)控作用的重要的細(xì)胞因子，它的突變或缺失會(huì)導(dǎo)致肌肉細(xì)胞的增生和肌纖維的肥大。有研究發(fā)現(xiàn)：MSTN基因敲除使小鼠肌肉生長(zhǎng)旺盛，肌纖維增生或肥大；該基因編碼序列發(fā)生突變導(dǎo)致其功能失活，使牛和狗肌肉產(chǎn)量明顯增加。由于MSTN對(duì)哺乳動(dòng)物骨骼肌的發(fā)育和生長(zhǎng)有負(fù)調(diào)控作用，所以通過(guò)抑制MSTN的生物活性能夠提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速度，增加肌肉的質(zhì)量和肌肉的瘦肉率，具有很好的研究前景。目前開(kāi)發(fā)的MSTN抑制劑主要有MSTN阻斷抗體、卵泡抑素、MSTN前肽等一些蛋白質(zhì)和多肽以及RNAi的干擾序列等抑制劑，上述抑制劑普遍存在生產(chǎn)成本高、效果不穩(wěn)定等缺點(diǎn)。MSTN抑制劑相關(guān)研究的突破將對(duì)豬、肉雞、肉牛等畜禽生產(chǎn)性能的提高具有特別重要的意義。我國(guó)豬肉年產(chǎn)量居世界第一，但是，目前對(duì)于豬MSTN抑制劑的開(kāi)發(fā)應(yīng)用方面還很薄弱，開(kāi)發(fā)MSTN抑制劑是促進(jìn)豬肉生長(zhǎng)的新途徑，也是降低生產(chǎn)成本的新方法之一，因此本發(fā)明通過(guò)化學(xué)合成一對(duì)特異抑制豬MSTN表達(dá)的核苷酸短鏈，從抑制肌肉生成抑制素表達(dá)方面來(lái)促進(jìn)豬肉生長(zhǎng)，為保持我國(guó)商品豬高效健康養(yǎng)殖持續(xù)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種促進(jìn)豬肌肉的生長(zhǎng)、肉質(zhì)優(yōu)良的豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑，其成分是經(jīng)過(guò)化學(xué)修飾的化學(xué)合成的雙鏈小RNA分子，

雙鏈小RNA?分子的正向序列為：5’-?UACCCUGUAGAUCCGGAUUUGU?-3’；

雙鏈小RNA?分子的反向序列為：5’-AsCsAAAUCCGGAUCUACAGGsGsUsAs-Chol3’，

反向序列進(jìn)行化學(xué)修飾，3’端膽固醇修飾-Chol，5’端兩個(gè)硫代修飾AsCs，?3’端4個(gè)硫代修飾GsGsUsAs，反向序列全堿基甲基化修飾。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

本發(fā)明是綜合運(yùn)用分子生物學(xué)、動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)和化學(xué)合成原理，在深入研究影響豬肉生長(zhǎng)的肌肉生長(zhǎng)抑制素的基礎(chǔ)上，研究開(kāi)發(fā)的具有高效、穩(wěn)定等特點(diǎn)的豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑。本發(fā)明生產(chǎn)工藝成熟、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定、價(jià)格合理、核心技術(shù)先進(jìn)和經(jīng)濟(jì)效益顯著，是目前比較理想的豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑，具有廣闊的市場(chǎng)前景。本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)是人工合成了促進(jìn)豬肌肉生長(zhǎng)的雙鏈小RNA分子，制作的豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑能夠明顯促進(jìn)豬的生長(zhǎng)，抑制MSTN表達(dá)，同時(shí)在使用豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑后豬肉質(zhì)不受影響。

附圖說(shuō)明

圖1為豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑對(duì)豬肌肉MSTN表達(dá)的影響(n=5)的柱形圖。

具體實(shí)施方式

以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。

實(shí)施例1

本發(fā)明實(shí)施例中，一種豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑，其成分是經(jīng)過(guò)化學(xué)修飾的化學(xué)合成的雙鏈小RNA分子，

雙鏈小RNA分子的正向序列為：?5’-UACCCUGUAGAUCCGGAUUUGU-3’；

雙鏈小RNA分子的反向序列為：5’-AsCsAAAUCCGGAUCUACAGGsGsUsAs-Chol3’，

反向序列進(jìn)行化學(xué)修飾，3’端膽固醇修飾-Chol，5’端兩個(gè)硫代修飾AsCs，3’端4個(gè)硫代修飾GsGsUsAs，反向序列全堿基甲基化修飾。

通過(guò)豬肌肉局部注射的方式，發(fā)揮豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑在肌肉生長(zhǎng)中的促進(jìn)作用。以不注射任何試劑為陰性對(duì)照組，以注射PBS為陽(yáng)性對(duì)照組，以注射豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑為試驗(yàn)組，試驗(yàn)組注射劑量為25μg/g?體重，連續(xù)注射7天，每天一次，注射完成后一周測(cè)定豬體生長(zhǎng)指標(biāo)，具體結(jié)果如表1：陽(yáng)性和陰性對(duì)照組豬的增重和肌纖維密度差異不顯著，與兩對(duì)照組相比，注射豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑的試驗(yàn)組豬增重和肌纖維密度均顯著提高。因此注射豬肌肉生長(zhǎng)促進(jìn)劑能改善豬生長(zhǎng)性能。