[發明專利]一種雞用微生態制劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201410457020.1
• 申請日: 2014-09-10
• 公開（公告）號: CN104212745B
• 公開（公告）日: 2017-01-25
• 發明（設計）人: 張從敬;黃迪海;秦卓明;王世榮;劉霞;張再輝;徐秀榮;盛曉丹
• 申請（專利權）人: 山東省健牧生物藥業有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;A23K10/18;A23K50/75;C12R1/23;C12R1/145;C12R1/01
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所37218
• 代理人: 張菡

技術領域

本發明涉及一種雞用微生態制劑及其制備方法，屬于微生物制劑制備技術領域。

背景技術

微生態制劑又名促生素、利生素、活菌制劑、益生素，是從動物或自然界分離、鑒定或通過生物工程人工組建的有益微生物，經培養、發酵、干燥、加工等特殊工藝制成的含有活菌并用于動物的生物制劑或活菌制劑。廣義的動物微生態制劑既包括正常微生物成員，即益生素(菌)，還包括一些能促進正常微生物群生長繁殖所需物質的制劑，如低聚糖等益生元。狹義上，微生態制劑就指益生素。本發明中所述微生態制劑為廣義含義的微生態制劑。

根據菌種組成，微生態制劑可分為單一菌制劑和復合菌制劑。常見的單一菌制劑為乳酸菌制劑、芽孢桿菌制劑、酵母菌制劑、放線菌制劑及光合細菌制劑等幾大類。作為本領域技術人員公知的是，所有微生物生長繁殖均需要培養基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源，但是不同類型微生物對營養物質的需求是不一樣的。所以，復合菌制劑的制備要遠遠難于單一菌制劑的制備；因此，目前所公開的復合菌制劑較少。其中所含復合菌種類最多的是日本琉球大學比嘉照夫教授發明的復合微生物制劑，由光合細菌、乳酸菌、酵母菌和放線菌等10屬8O多種微生物組成。但是健康人群以及其它動物的腸道中存在的菌種種類高達1000多種，這些微生物菌群在腸道免疫系統的形成上扮演著重要作用，且每種微生物對于維持機體消化和維生素代謝以及對于宿主的健康都是功不可沒的，如果改變腸道菌群的組成將會增加食品過敏或者腸道炎性疾病的風險。所以，單一菌制劑和復合菌制劑存在以下缺陷：1.單一菌種和復合制劑功能不全面，聯合、協調和疊加作用不明顯；2.有些單一菌種和復合制劑使用的菌種非原籍菌，存在致病風險。

發明內容

????本發明的目的在于提供一種含有與固有菌群的桿菌球菌比例、陽性菌陰性菌比例基本保持一致菌群的微生態制劑及其制備方法。

本發明實現上述發明目的的技術方案：

一種雞用微生態制劑的制備方法，其步驟為：

（1）將SPF成年母雞全腸內容物用9-11倍其重量的培養基稀釋，然后過濾，得濾液；

????（2）將濾液按9-11%的接種量接種于培養基，于厭氧培養系統、40.5-41.5℃靜止培養35-37h，得腸菌培養液種子液；

（3）將種子液按4.5-5.5%的接種量接種于發酵罐中，向罐內充氮氣，保持壓力為0.018-0.022MPa、pH為6.8-7.0，于40.5-41.5℃靜止培養46-50h。

步驟（2）和（3）所用培養基的制備方法：取豆芽液300ml，然后向其加入魚粉蛋白胨8g、鹽酸半胱氨酸0.6g、大豆蛋白胨6g、維生素B₁0.4g、牛肉膏20g、酵母浸粉2g、可溶性淀粉0.5g、葡萄糖10g、磷酸氫二鉀25g，硫酸鎂10g；然后加熱至溶解，再攪拌至混合均勻；然后加水補足1000ml，再調pH值至7.0；于121℃滅菌30分鐘即得1000ml培養基。

上述制備方法，其步驟（1）、（2）和（3）中的數據（用量比例、發酵參數）的改變會影響所制備的微生態制劑的品質；即含菌群的種類、各菌群的含量、活菌含量、常溫保存期等。所以，必須將上述數據限定在本發明的范圍內，此時所制備的生態制劑的有效活菌含量不低于100億個/ml，常溫保存期可達8個月；與雞腸道內固有菌群相比，其桿菌球菌比例、陽性菌陰性菌比例與雞腸道內固有菌群的基本保持一致，桿菌球菌的比例80:20-85:15之間；革蘭氏陽性菌和陰性菌的比例在75:25-85:15之間；且嗜酸乳桿菌、丁酸梭菌、糞球菌、乳酸片球菌、酵母菌和含量分別增加8-10%、4-5%、4-5%、8-10%、4-5%。

上述制備方法，優選的，步驟（1）中全腸內容物與培養基的重量比為1:10；

步驟（2）中濾液按10%的接種量接種于培養基，41℃靜止培養36h；

步驟（3）中將種子液按5%的接種量接種于發酵罐中，壓力為0.02MPa、pH為6.8-7.0，于?41℃靜止培養48h。在此制備條件下制備的生態制劑，有效活菌含量不低于110億/ml，常溫保存期可達9個月，其桿菌球菌比例、陽性菌陰性菌比例與雞腸道內固有菌群的比例更加一致；桿菌球菌的比例為80:16-18；革蘭氏陽性菌和陰性菌的比例為75:21-24；其嗜酸乳桿菌、丁酸梭菌、糞球菌、乳酸片球菌、酵母菌和含量分別增加10%、5%、5%、10%、5%。

本發明還提供了一種采用上述方法制備的雞用微生態制劑。