[發(fā)明專(zhuān)利]檢測(cè)口蹄疫病毒、豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒的基因芯片以及試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410455941.4
• 申請(qǐng)日: 2014-09-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104232792A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 文心田;李金海;李興玉;黃小波;曹三杰;文翼平;伍銳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/70
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 成都高遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種檢測(cè)口蹄疫病毒、豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒的基因芯片以及檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

口蹄疫(foot-and-mouth?disease，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的偶蹄動(dòng)物的一種急性，熱性，高度傳染性疫病，主要特征是在口腔粘膜、蹄部、乳房、皮膚出現(xiàn)水皰，繼而發(fā)生潰瘍的一類(lèi)傳播速度極快的傳染病。該病嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)，影響國(guó)際貿(mào)易和國(guó)家聲譽(yù)，受到了各國(guó)政府的普遍關(guān)注，被國(guó)際獸疫局列為法定通報(bào)的動(dòng)物傳染病，我國(guó)將其列為一類(lèi)重大動(dòng)物疫病之首。FMD易感動(dòng)物包括牛、綿羊、山羊、駱駝和豬等70多種家養(yǎng)和野生偶蹄類(lèi)動(dòng)物。該病曾在全球范圍廣泛流行，給世界養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。近年來(lái)，我國(guó)曾發(fā)生過(guò)O型、A型、Asia1型3個(gè)血清型的FMD疫情：2005年～2007年發(fā)生多起Asia1型口蹄疫疫情；2009年武漢、上海和北京發(fā)生A型FMD疫情；2009年和2010年在中國(guó)臺(tái)灣與香港自治區(qū)相繼發(fā)生O型FMD疫情，在2010年廣東省廣州市的白云區(qū)發(fā)生O型FMD疫情，至2010年末我國(guó)大陸的9個(gè)省的18個(gè)地方發(fā)生O型FMD疫情。此外，在健康牛群中發(fā)現(xiàn)有帶毒情況。我國(guó)周邊的印度、越南、阿富汗等國(guó)家FMD流行情況比較復(fù)雜，國(guó)外毒株多次傳入我國(guó)，對(duì)我國(guó)FMD的防控造成巨大的威脅。FMD傳染性強(qiáng)，危害巨大，快速、準(zhǔn)確的診斷對(duì)FMD的防控具有重要意義。

豬瘟(Classical?Swine?Fever，CSF)是由豬瘟病毒(CSFV)引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，可表現(xiàn)為急性、慢性、非典型或母豬繁殖障礙的病程，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為須申報(bào)的動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類(lèi)傳染病。近年來(lái)，一些已宣布消滅豬瘟的歐洲國(guó)家出現(xiàn)了豬瘟疫情的復(fù)發(fā)，2005年～2012年期間，共有46個(gè)國(guó)家和地區(qū)發(fā)生了豬瘟。總體上，豬瘟在我國(guó)得到了有效的控制，但該病在我國(guó)很多地方仍然廣泛存在，其流行形式也以非典型CSF為主，此外，由于多種因素的影響，豬瘟疫苗免疫失敗的現(xiàn)象較為普遍。對(duì)豬瘟的防控仍然是豬群疫病防控的重點(diǎn)之一。

豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine?Reproductive?and?Respiratory?Syndrome，PRRS)又稱(chēng)豬藍(lán)耳病，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine?Reproductive?and?Respiratory?Syndrome，PRRSV)，引起豬的高度接觸性傳染病。按臨床表現(xiàn)的不同可分為經(jīng)典豬藍(lán)耳病和高致病性豬藍(lán)耳病。經(jīng)典豬藍(lán)耳病以母豬繁殖障礙、早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎和仔豬呼吸綜合征為特征；高致病性豬藍(lán)耳病以高度接觸性傳播、全身出血、肺部實(shí)變和母豬繁殖障礙為特征，仔豬、育肥豬和成年豬均可發(fā)病和死亡，其中仔豬發(fā)病率可達(dá)100％，死亡率可達(dá)50％以上，母豬流產(chǎn)率可達(dá)30％以上。我國(guó)2008年新修訂的《一、二、三類(lèi)動(dòng)物疫病病種名錄》將高致病性豬藍(lán)耳病列為一類(lèi)動(dòng)物疫病。目前，該病已廣泛流行于世界上所有養(yǎng)豬的國(guó)家和地區(qū)，是危害養(yǎng)豬業(yè)最嚴(yán)重的疾病。PRRSV自上世紀(jì)90年代傳入我國(guó)以來(lái)，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的損失，特別是2006年下半年爆發(fā)的高致病性豬藍(lán)耳病(HPRRSV)疫情，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，我國(guó)PRRSV流行毒株主要為美洲型，經(jīng)典株和高致病性變異株均在豬群中廣泛存在。

口蹄疫(FMD)、豬瘟(CSF)和豬藍(lán)耳病(豬繁殖與呼吸綜合征，PRRS)可造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，對(duì)這3個(gè)病的防控是豬群疫病防控的重點(diǎn)和首要任務(wù)。對(duì)發(fā)病畜禽進(jìn)行及時(shí)準(zhǔn)確地診斷，大量開(kāi)展動(dòng)物疫病主動(dòng)監(jiān)測(cè)，掌握畜禽疫病的感染情況，是采取科學(xué)防控措施的前提和基礎(chǔ)，也是提高動(dòng)物疫病科學(xué)防控水平的必然要求；同時(shí)，通過(guò)監(jiān)測(cè)，對(duì)病原學(xué)陽(yáng)性動(dòng)物進(jìn)行凈化，可有效降低野毒污染，促進(jìn)畜禽健康。目前針對(duì)FMDV、CSFV和PRRSV的病原學(xué)檢測(cè)方法已有很多報(bào)道，對(duì)每個(gè)病單獨(dú)檢測(cè)，費(fèi)事、耗力，增加了檢測(cè)成本。生產(chǎn)中迫切需要敏感性高、特異性強(qiáng)的高通量聯(lián)合檢測(cè)技術(shù)，以提高檢測(cè)效率，有效降低勞動(dòng)強(qiáng)度，節(jié)約檢測(cè)成本。

目前，公告號(hào)為CN1274849C的專(zhuān)利公開(kāi)了同時(shí)檢測(cè)口蹄疫病毒、豬瘟病毒、偽狂犬病病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒的基因芯片，但是該文件中沒(méi)有芯片的特異性和靈敏度試驗(yàn)，不能說(shuō)明其可以特異且靈敏地同時(shí)檢出口蹄疫病毒、豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種特異性強(qiáng)、靈敏度高、可同時(shí)檢測(cè)口蹄疫病毒、豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒的基因芯片和試劑盒。