[發(fā)明專利]一種野百合堿的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410450577.2
• 申請日: 2014-09-05
• 公開（公告）號: CN104177369A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蘇劉花;楊存
• 申請（專利權(quán)）人: 南京澤朗生物科技有限公司
• 主分類號: C07D491/16
• 分類號: C07D491/16
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種野百合堿的制備方法。

背景技術(shù)

野百合堿，CAS號?315-22-0，分子式?C16H23NO6，分子量325.36，分子結(jié)構(gòu)：

?

野百合堿對小鼠肉瘤-180、白血病L615、大鼠瓦克癌-256等均有一定的抑制作用（接種后24小時開始治療），其中以對瓦克癌-256療效最為顯著。另有報告，對S37抑制率為54～75%。如在野百合堿母核氮原子上引入氧原子，毒性可降低，但對肉瘤-180的抑制率亦隨之降低。臨床試用于皮膚癌及子宮癌有較好的療效，對白血病亦有一定效果。此生物堿為雙稠吡咯啶類，其抗癌作用與烷化劑相似。通過文獻(xiàn)檢索，從野百合中制備野百合堿的方法披露較少，多采用硅膠柱分離，操作復(fù)雜，生產(chǎn)成本高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種操作簡單的野百合堿的制備方法。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種野百合堿的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）取野百合原料，加酸性水溶液浸泡5-10小時，提取3次，提取液濾過加入超濾膜，透過液加入納濾膜濃縮，得濃縮液；

2）上述濃縮液調(diào)節(jié)ph10-12，用氯仿萃取2-3次，萃取液濃縮，再用高速逆流色譜儀分離，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集流分減壓干燥即得。

所述步驟1）中的超濾膜為截留分子量3000-10000的中空纖維素膜，納濾膜為截留分子量100-200的中纖維素納濾膜。

所述步驟2）中高速逆流色譜分離溶液系統(tǒng)為取氯仿、甲醇、水，按1~6:1~4:2~7混合，取上相做固定相、下相為流動相，主機(jī)轉(zhuǎn)速700~900rpm，流速為1~3ml/min。

采用上述技術(shù)方案生產(chǎn)野百合堿，方法操作簡單，制備量大而且周期短，同時膜過濾溶液和高速逆流色譜溶液可以循環(huán)利用，減少環(huán)境污染。

具體實(shí)施方式

???下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。

實(shí)施例1：

取野百合堿原料5kg，加30Lph1鹽酸性水溶液浸泡5小時，提取3次，提取液濾過后加入截留分子量3000的中空纖維素膜，透過液再經(jīng)過截留分子量200的中纖維素納濾膜濃縮，得濃縮液，濃縮液用氨水調(diào)節(jié)ph10，用氯仿萃取3次，萃取液濃縮。取氯仿、甲醇、水，按2:1:2混合，取上相做固定相、下相為流動相，主機(jī)轉(zhuǎn)速850rpm，流速為2ml/min，紫外檢測器在線監(jiān)測，連續(xù)制備，收集流分減壓干燥得野百合堿1.3g，經(jīng)HPLC檢測，含量98.1%。

?實(shí)施例2：

?取野百合堿原料5kg，加50Lph3鹽酸性水溶液浸泡10小時，提取2次，提取液濾過后加入截留分子量6000的中空纖維素膜，透過液再經(jīng)過截留分子量100的中纖維素納濾膜濃縮，得濃縮液，濃縮液用氨水調(diào)節(jié)ph12，用氯仿萃取3次，萃取液濃縮。取氯仿、甲醇、水，按3:2:1混合，取上相做固定相、下相為流動相，主機(jī)轉(zhuǎn)速900rpm，流速為2ml/min，紫外檢測器在線監(jiān)測，連續(xù)制備，收集流分減壓干燥得野百合堿1.5g，經(jīng)HPLC檢測，含量97.1%。

?實(shí)施例3：

?取野百合堿原料5kg，，加40Lph2鹽酸性水溶液浸泡6小時，提取3次，提取液濾過后加入截留分子量10000的中空纖維素膜，透過液再經(jīng)過截留分子量200的中纖維素納濾膜濃縮，得濃縮液，濃縮液用氨水調(diào)節(jié)ph11，用氯仿萃取3次，萃取液濃縮。取氯仿、甲醇、水，按6:4:7混合，取上相做固定相、下相為流動相，主機(jī)轉(zhuǎn)速800rpm，流速為1ml/min，紫外檢測器在線監(jiān)測，連續(xù)制備，收集流分減壓干燥得野百合堿1.2g，經(jīng)HPLC檢測，含量97.5%。