[發明專利]一種知母總皂苷的提取方法

在審

• 申請號: 201410450515.1
• 申請日: 2014-09-05
• 公開（公告）號: CN104173700A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 蘇劉花;楊存
• 申請（專利權）人: 南京澤朗生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/8964
• 分類號: A61K36/8964
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種生物酶解技術與大孔吸附樹脂相結合的方法提取、純化知母總皂苷。

背景技術

知母，中藥名，屬清熱下火藥。主治：溫熱病、高熱煩渴、咳嗽氣喘、燥咳、便秘、骨蒸潮熱、虛煩不眠、消渴淋濁。知母也叫毛知母，在我國各地都有栽培，它有很強的抗旱抗寒能力，屬多年生草本植物，在干旱少雨的荒山、荒漠、荒地中都能生長，是綠化山區和荒原的首選品種，它在全年各個季節都能播種，但主要以春播或夏播。知母為常用中藥材，被社會廣泛使用。家種知母主產河北省安國市、安徽省亳州市，?形成了全國知名的兩個種植基地。野生毛知母主產地河北張北、易縣、赤城、來源、阜平；山西榆社、五臺、代縣、壽陽；內蒙古扎魯特旗、西烏珠穆、東臺珠穆、林西、科爾左中旗、阿榮旗；遼寧鐵嶺、阜新等地亦有分布。

現代研究證明，知母根莖中含總皂甙約6%，其中有知母皂甙（Timosaponin）A-Ⅰ、A-Ⅱ、A-Ⅲ、A-Ⅳ，?B-Ⅰ和B-Ⅱ。其中知母皂甙A-Ⅰ是薩爾薩皂甙元β-D-吡喃半乳糖甙，知母皂甙A-Ⅲ是薩爾薩皂甙元與知母雙糖（Timobiose）結合而成的雙糖甙。知母根莖中的皂甙元有薩爾薩皂甙元（Sarsasapogenin）、嗎爾考皂甙元（Markogenin）、新芰脫皂甙元（Neogitogenin）。以前從知母中分離出來的皂甙知母寧（Asphonin）是嗎爾考皂甙、知母皂甙A-Ⅲ、A-Ⅳ、B等的混合物．亦分離出異菝葜皂甙元（Smilagenin）等皂甙類成分。尚含有黃酮類的芒果甙（Mangiferin,Chi-?monin），?異芒果甙（Isomangiferin）；生物堿類的膽堿（Choline），尼克酰胺（Nicotinamide）；有機酸類的鞣酸（Tannic?acid），?煙酸（Nicotinic?acid）以及四種知母多糖（Anemarn?A，B，C，D）。另外尚含鐵、鋅、錳、銅、鉻、鎳等多種金屬元素以及黏液質、還原糖等。可以用于溫病，邪在氣分，高熱、煩渴的氣分實熱證，有瀉火除煩的作用，與石膏、竹葉配伍有協同之效；用于治療肺熱咳嗽或陰虛燥咳，有清泄肺火，滋陰潤肺之效。常與貝母同用以增強清肺潤燥之功，如《醫方集解》二母散；用于陰虛火旺，骨蒸潮熱，盜汗者，有滋陰降火的作用，常與黃柏相須為用；既能清泄肺胃之火，又能滋養肺腎之陰，故宜用于陰虛消渴，癥見口渴、飲多、尿多者，同山藥、五味子等配合使用可增強療效，如玉液湯。

皂苷（saponin）別稱：堿皂體、皂素、皂甙、皂角苷或皂草苷。“皂苷”一詞由英文名?Saponin?意譯而來，英文名則源于拉丁語的?Sapo，意為肥皂。皂苷（Saponin）是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷，主要分布于陸地高等植物中，也少量存在于海星和海參等海洋生物中。?許多中草藥如人參、遠志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮靜、抗癌等有價值的生物活性。

目前，在我國有關提取知母總皂苷的工藝文獻和專利都很少見到。本發明采用生物酶解技術與大孔吸附樹脂相結合的方法提取、純化知母總皂苷。該發明操作過程簡單，提取率高，對環境污染小，成本消耗低，易于實現工業化生產。

發明內容

本發明的目的是為了填補從知母中提取總皂苷工藝的空白，提供一種操作簡單、提取效率高、污染小的知母總皂苷的提取方法。

?為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

1）將知母烘干，粉碎；

2）稱取一定量的知母粉末加水浸潤，然后加入知母粉末重量0.5%-3%的生物酶試劑進行酶解處理，收集酶解原料；

3）然后加入乙醇水溶液回流提取，得到提取液；

4）將提取液過濾，濾渣重復提取2-3次，合并提取液，減壓濃縮至原體積的1/4-1/2，得到知母總皂苷濃縮液；

5）將濃縮液上大孔吸附樹脂柱洗脫，收集乙醇洗脫液減壓濃縮，干燥，即得知母總皂苷。

步驟2）中所述的粉末大小為40-60目，粉末與水的質量體積比為1：0.5-1倍，浸泡時間為30-60分鐘。

步驟2）中所述的生物酶為纖維素酶、淀粉酶、半纖維素酶和果膠酶中的一種，酶解時的溫度設定在30-45℃，酶解時間為2-4小時。

步驟3）中所述的乙醇水溶液濃度為50%-70%，體積為粉末重量的3-6倍。

步驟5）中所述的大孔吸附樹脂為X-5、AB-8、NK-2、NKA-2、NK-9、D3520、D101、WLD中的一種。