[發明專利]一株莖點霉屬內生真菌及其應用

有效

• 申請號: 201410447123.X
• 申請日: 2014-09-04
• 公開（公告）號: CN104293681B
• 公開（公告）日: 2017-04-12
• 發明（設計）人: 王洪凱;陳亞平;林福呈
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C09K17/00;C12R1/645;C09K101/00
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司33224
• 代理人: 胡紅娟

技術領域

本發明屬于微生物種質資源利用領域，具體涉及一株莖點霉屬內生真菌及其應用。

背景技術

土壤鹽堿化降低了耕地的生產力，是糧食生產中一個非常重要的非生物脅迫，每年給世界的糧食生產造成嚴重的損失，并且嚴重影響到地區的生態平衡。目前，全世界有超過8億公頃的土地存在土地鹽漬化的問題，占據了所有陸地面積的6％。特別是在干旱、半干旱和地中海式氣候的地區，這個問題更為嚴重。近些年來，不合理的耕種和灌溉，以及環境污染和生態平衡的破壞是導致鹽漬化的問題的主要原因。我國土壤鹽漬化問題十分嚴峻，鹽堿地分布范圍廣、面積大、類型多，主要分布在華北平原、東北平原、西北內陸地區及濱海地區。所以，如何改良和利用大面積的鹽堿地，提高植物的耐鹽堿能力已經成為我國生物科學技術領域的急待解決的重大課題。這也對改善生態環境，推動區域經濟、社會和生態可持續發展具有特別重要意義。

國內外鹽堿地改良方法主要有水利工程措施、農業改良措施、生物改良措施以及化學改良措施等。水利工程措施主要是指大水洗鹽；農業改良措施主要包括鋪沙蓋土、客土換土、深挖埋綠肥、深耕翻土等；化學改良措施主要是添加土壤改良劑，目前常用的主要有石膏、石灰石、磷石膏等；生物改良措施主要是種植耐鹽堿的植物如向日葵，甜菜、玉米、大麥、大豆、棉花、高粱等，使鹽堿地在利用過程中得到改良。

選擇耐鹽品種也是利用鹽漬化土壤的主要途徑。許多研究人員希望可以通過培育耐鹽植物來解決土壤鹽漬化的利用問題，可是由于植物在耐鹽性方面遺傳和生理的復雜性，并未得到理想的成果。近些年研究發現共生菌對提高植物的耐鹽性具有較好的效果，不僅可以改善土壤狀況還可以增強植物的生長。因此，通過微生物與植物的共生來增強植物的耐鹽性具有良好的應用前景。

小麥和水稻是重要的糧食作物，具有重要的經濟意義。提高這些糧食作物的抗鹽堿能力，使其在鹽漬化的土壤也能夠形成具有一定規模的產量，對有效利用鹽漬化土地、擴大小麥和水稻的種植面積具有重要前景。

近年來，關于叢枝菌根真菌對植物耐鹽性的影響的研究展示了真菌在增強植物耐鹽性上的潛力。利用內生真菌提高大豆抗鹽性的研究也已經有了研究報道，但內生真菌在提高水稻和小麥的耐鹽、抗鹽性上的作用還沒有發表研究報告。

發明內容

本發明提供了一株莖點霉屬內生真菌，該菌株能夠提高水稻和小麥對鹽脅迫的耐受能力。

一株莖點霉屬內生真菌，分類命名為莖點霉(phoma?sp.)，株號為KDZ-5，已于2014年4月25日保藏于位于中國武漢市武漢大學的中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC?No.M?2014162。

本發明的莖點霉屬內生真菌KDZ-5(即Phoma?sp.KDZ-5)具有如下特性：該菌株在PDA平板上，菌落生長迅速，25℃黑暗條件下培養7天，菌落直徑平均5.2cm；初期菌落呈灰白色，后期逐漸呈深灰色至棕褐色，菌落質地較硬，菌絲具隔膜，無色至黃褐色，分生孢子器、分生孢子未見；其ITS序列如SEQ?ID?No.1所示。

本發明還提供了一種含有所述莖點霉屬內生真菌的菌劑。由于所述莖點霉屬內生真菌不產孢，因此所述菌劑采用所述莖點霉屬內生真菌的菌絲制成。菌劑的劑型可以根據需要制成固體劑型或液體劑型，若為液體劑型，作為優選，所述莖點霉屬內生真菌菌絲的濃度為1～3g/L。根據使用場合的差異，所述液體劑型可采用水(有土栽培)或Hoagland’s營養液(無土栽培)配制。

試驗表明，在鹽脅迫下，水培營養液或土壤中接種KDZ-5菌株的小麥幼苗出現失綠發黃、萎焉干枯等鹽害癥狀比對照組推遲、癥狀較輕、長勢更旺盛；表現為：在100mM鹽濃度脅迫14d后，水培營養液中接種KDZ-5的小麥苗在株高、鮮重、干重上都得到了顯著增加，分別提高了7.8％、21.6％。13.0％；在200mM鹽脅迫下，土壤中接種KDZ-5的小麥苗在鮮重和干重上分別比對照組提高了10.9％和12.5％；在250mM鹽脅迫下，接種KDZ-5的小麥苗比對照組在株高、鮮重和干重上分別增加了51.4％、10.2％、18.5％；說明KDZ-5菌株可以增強小麥幼苗對鹽脅迫的抵御能力。

因此，本發明還提供了所述莖點霉屬內生真菌在提高小麥耐鹽性中的應用。所述應用包括：在鹽堿地土壤中拌入所述莖點霉屬內生真菌，然后將萌發的小麥種子播種于鹽堿地中；

小麥種子在發芽生長過程中，所述莖點霉屬內生真菌即自然地與小麥種子建立起了共生關系。

或者，所述應用包括：將小麥幼苗與所述莖點霉屬內生真菌建立共培養體系(即共生體系)，然后將共培養體系轉移至鹽堿地中生長。