[發(fā)明專利]一種從三尖杉中提取三尖杉堿的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201410445697.3
• 申請日: 2014-09-04
• 公開（公告）號: CN104193755A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張金芳;楊存
• 申請（專利權(quán)）人: 南京標(biāo)科生物科技有限公司
• 主分類號: C07D491/20
• 分類號: C07D491/20
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種從三尖杉中提取三尖杉堿的方法，尤其涉及一種超聲波-微波提取三尖杉堿的方法，屬于中藥有效成分分離領(lǐng)域。

背景技術(shù)

三尖杉堿，分子式C₁₈H₂₁NO₄，白色晶體，m.p132~133℃，廣泛存在于三尖杉屬植物的根、、莖、葉、干和果實(shí)中，占三尖杉屬植物所含生物總堿的40~80%，它是抗癌新藥-三尖杉酯堿和高三尖杉酯堿的母體，由于它獨(dú)特的五元稠環(huán)結(jié)構(gòu)，具有顯著的抗癌作用，臨床治療惡性腫瘤的有效率為32.4%（特別是慢性白血?。?。

目前關(guān)于三尖杉堿的合成文獻(xiàn)較多，如葉仙蓉報(bào)道的“三尖杉堿和橋氧三尖杉堿衍生物的合成及抗腫瘤活性”一文，該合成路線冗長，不能用于規(guī)模化的生產(chǎn)；而從三尖杉屬植物中分離提純?nèi)馍級A的文獻(xiàn)及專利較少，且需要高效液相制備色譜分離，以及三氯甲烷、苯等有毒試劑，不適于工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種工藝簡單、易操作、快速、高效的提取三尖杉堿的方法。

本發(fā)明包括以下步驟：

a.三尖杉根莖粉碎，過100目篩；

b.取三尖杉粗粉，加入8~10倍的70~80%的乙醇溶液，調(diào)節(jié)PH值為3.0~4.0，置于超聲-微波提取裝置中，超聲波600W（常開），微波功率為400~500W，提取時(shí)間為90~120min；

c.將上述的提取液離心，取上清液，堿調(diào)PH值至9~11，直接通過三氧化二鋁柱吸附，乙醚洗脫，流速為10mL/min，至流出洗脫液無生物堿反應(yīng)為止；

d.濃縮洗脫液，用氯仿萃取2~3次，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得三尖杉堿粗品；

e.無水乙醇重結(jié)晶2次，即得三尖杉堿純品。

步驟b中所述的調(diào)節(jié)PH的酸為檸檬酸或鹽酸。

步驟c中所述的堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉等。

本發(fā)明利用超聲波-微波協(xié)同提取藥材有效成分的工藝充分利用了超聲振動(dòng)的空化作用以及微波的高能作用，超聲可破壞藥材的細(xì)胞，使溶劑易于滲入細(xì)胞內(nèi)，同時(shí)超聲波的強(qiáng)烈振動(dòng)能傳遞巨大能量給浸提的藥材和溶劑，使它們做高速運(yùn)動(dòng)，加強(qiáng)了胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散和溶解；而微波的高能作用，使樣品介質(zhì)內(nèi)的各點(diǎn)受到的作用一致，加速目標(biāo)物從固相進(jìn)入溶劑的過程。該方法具有高效性和強(qiáng)選擇性，操作簡單，產(chǎn)率高，成本低等優(yōu)點(diǎn)。

下面將結(jié)合具體實(shí)施方式進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

具體實(shí)施方式：

實(shí)施例1：

三尖杉枝葉粉碎，過100目篩，取三尖杉粗粉1kg，加入8倍的70%的乙醇溶液，鹽酸調(diào)節(jié)PH值為3.0，置于超聲-微波提取裝置中，超聲波600W（常開），微波功率為400W，提取時(shí)間為90min，提取液離心，取上清液，氫氧化鈉調(diào)PH值至9，直接通過三氧化二鋁柱吸附，乙醚洗脫，流速為10mL/min，至流出洗脫液無生物堿反應(yīng)為止，濃縮洗脫液，用氯仿萃取3次，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得三尖杉堿粗品，無水乙醇重結(jié)晶2次，即得白色晶體三尖杉堿1.85g，經(jīng)檢測，光學(xué)純度為90.1%。

實(shí)施例2：

三尖杉枝葉粉碎，過100目篩，取三尖杉粗粉1kg，加入9倍的80%的乙醇溶液，鹽酸調(diào)節(jié)PH值為4.0，置于超聲-微波提取裝置中，超聲波600W（常開），微波功率為450W，提取時(shí)間為110min，提取液離心，取上清液，氫氧化鈉調(diào)PH值至10，直接通過三氧化二鋁柱吸附，乙醚洗脫，流速為10mL/min，至流出洗脫液無生物堿反應(yīng)為止，濃縮洗脫液，用氯仿萃取3次，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得三尖杉堿粗品，無水乙醇重結(jié)晶2次，即得白色晶體三尖杉堿1.90g，經(jīng)檢測，光學(xué)純度為93.2%。

實(shí)施例3：

三尖杉枝葉粉碎，過100目篩，取三尖杉粗粉1kg，加入10倍的75%的乙醇溶液，檸檬酸調(diào)節(jié)PH值為3.5，置于超聲-微波提取裝置中，超聲波600W（常開），微波功率為500W，提取時(shí)間為120min，提取液離心，取上清液，氫氧化鈉調(diào)PH值至11，直接通過三氧化二鋁柱吸附，乙醚洗脫，流速為10mL/min，至流出洗脫液無生物堿反應(yīng)為止，濃縮洗脫液，用氯仿萃取2次，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得三尖杉堿粗品，無水乙醇重結(jié)晶2次，即得白色晶體三尖杉堿1.86g，經(jīng)檢測，光學(xué)純度為92.5%。?