[發明專利]多葉菊蒿素在制備抗腫瘤藥物中的應用

在審

• 申請號: 201410445646.0
• 申請日: 2014-09-04
• 公開（公告）號: CN104173333A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 張金芳;楊存
• 申請（專利權）人: 南京標科生物科技有限公司
• 主分類號: A61K31/365
• 分類號: A61K31/365;A61P35/00
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明屬于醫藥領域，涉及多葉菊蒿素在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

多葉菊蒿素（Tamirin）為萜類化合物，分子式：C15H18O4，分子量：262.31，結構式：

?

多葉菊蒿素具有細胞毒活性。對人型小細胞肺癌株GLC4和人型結腸癌株COLO的IC50分別為1.0μM和2.2μM(對照品Cisplatin為1.0μM和3.0μM。多頭菊蒿素來源于菊科多頭菊蒿Tanacetum?polycephalum?Sch.Bip.的地上部分。

通過文獻檢索，?國內尚未見多葉菊蒿素用于制備抗腫瘤藥物。

發明內容

為滿足臨床需要，擴大用藥品種，更好地治療癌癥，應用多葉菊蒿素制備抗腫瘤藥物。

本發明的技術方案如下：

本發明所述的多葉菊蒿素，其制備方法包括以下步驟：

（1）取多頭菊蒿地上部分粉碎，按固液體積比為5：1.5-2加入夾帶劑，在壓力22-35MPa，溫度35-48℃條件下，通入液態CO₂萃取90-180min，在壓力7-9MPa，溫度30-35℃條件下解析，收集萃取液；

（2）將步驟（1）中得到的萃取液加硅藻土攪拌脫色，過濾得到脫色液；

（3）將步驟（2）中得到的脫色液濃縮至相對密度為1.12，上中性氧化鋁柱，用石油醚-乙酸乙酯洗脫純化，得到多葉菊蒿素粗品；

（4）粗品經過制備型高效液相色譜精制得到高純度的多葉菊蒿素。

所述步驟（1）中，夾帶劑為甲醇或乙醇溶液。

所述步驟（2）中，硅藻土加入量為藥材量的3-4.5%

所述步驟（3）中，石油醚-乙酸乙酯的體積比為3:14。

所述步驟（4）中，制備型高效液相色譜流動相為甲醇-乙腈-水，體積比為19:38:45。

多葉菊蒿素在制備抗腫瘤藥物中的應用。

通過體外腫瘤細胞體外抑制試驗，觀察多葉菊蒿素的抗腫瘤作用，結果表明多葉菊蒿素對GLC4肺癌和COLO結腸癌均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性，且其毒副作用小。

本發明的有益效果通過以下實驗得到了驗證：

實驗方法：

1、受試提取物：多葉菊蒿素提取物

（1）性狀：結晶，味苦。

（2）規格：含多葉菊蒿素≥90%。

（3）溶劑：乙醇或甲醇。

（4）儲存條件：4℃，密封保存。

2、細胞株：肺癌細胞株GLC4、結腸癌細胞株COLO。?

3、給藥劑量和方法

多葉菊蒿素組：10mg/kg/天，灌胃給藥，隔一天一次，共五天。

陰性對照組：10mg/kg/天，生理鹽水肌注給藥，隔一天一次，共五天。

陽性對照組：30mg/kg/天，5-氟尿嘧啶肌注給藥，隔一天一次，共五天。

灌胃后2h，用HPLC檢測血漿藥物濃度。

4、種植瘤模型的建立與給藥

（1）皮下種植：分別將上述細胞培養至90%融合，收集細胞，取2×10^?6細胞懸液，注射至小鼠肋下皮下組織，于術后15天取材，稱量瘤重。另取同樣模型，觀察30天，計算藥物對模型動物存活率的影響。

（2）肺內種植瘤肺轉移模型：取2×10^?6細胞懸液注射至小鼠肺包膜內，于術后15天取肺，測量瘤重和肺轉移數。

（3）給藥方式：種植瘤細胞同時給藥。

5、結果

結果如表1、表2和表3顯示，多葉菊蒿素組用藥均有不同程度的抑制腫瘤生長和轉移的作用，可延長實驗小鼠的生存期。

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表1??多葉菊蒿素對種植瘤的抑制作用（n=20，±S）

表2??多葉菊蒿素對腫瘤轉移發生率的影響（n=20，%）

表3??多葉菊蒿素對實驗小鼠生存率的影響（n=20，%）

由表1、表2和表3可以看出，多葉菊蒿素組用藥抑制腫瘤生長、轉移的效果與陽性對照組基本相當，可有效延緩實驗小鼠的生存壽命，其效果明顯優于對照組。

本發明用于制備抗腫瘤藥物時，將多葉菊蒿素與醫學上可接受的輔料一起制成抗腫瘤的藥物，藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。

本發明用于制備抗腫瘤藥物時，在其口服配方中添加腸吸收促進劑，包含中鏈脂肪酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。