[發明專利]一種高效解磷菌及其應用

有效

• 申請號: 201410445552.3
• 申請日: 2014-09-03
• 公開（公告）號: CN104263679A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 徐虹;馮小海;殷文鋒;許宗奇;李莎
• 申請（專利權）人: 南京聚肽高科農業有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;C12R1/125
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 胡建華

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，具體涉及一種高效解磷菌及其應用。?

背景技術

磷是植物生長發育不可缺少的大量元素之一，是植物的重要組成成分，并以多種方式參與植物體內各種生理生化過程，對促進植物的生長發育和新陳代謝起著重要的作用，但是土壤中的磷絕大部分不能被植物直接吸收。據調查，中國有74％的耕地土壤缺磷，土壤中95％的磷為無效形式，植物很難吸收利用，其中難溶性有機磷一般占土壤全磷的20％-50％，占難溶性土壤磷總量的10％-85％。施入的磷肥本季節利用效率為5％-25％，大部分磷與土壤中的Ca²⁺、Fe³⁺、Al³⁺結合形成難溶性磷酸鹽。大量使用化肥明顯造成土壤板結、土壤保水力下降、草地退化、荒漠化嚴重等不良后果。因此，提高磷的利用率一直是農學、土壤學、生態環境和微生物學研究者關注的熱點。?

解磷微生物是土壤中能夠將無效磷轉化為植物可以吸收利用的有效磷的一類特殊微生物功能群體，在自然及農業生態的磷素生物地化循環中起到了關鍵作用。解磷細菌是解磷微生物中重要的一類，通過活化土壤磷元素或影響植物根系分泌物的種類和數量，增加植物根系對K、Ca、Mg、Fe、Zn等營養元素的吸收，從而促進植物的生長發育。解磷細菌還通過分泌各種酶類或有機酸來活化土壤中的難溶態磷，并影響根際微生物的群落結構。大量研究表明，施用含有高效解磷細菌的微生物菌劑能顯著促進植物生長、改善植株根際環境。因此，高效解磷微生物的篩選及其制備對于現代農業的發展至關重要。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種具有降解土壤難溶無機磷，為植物提供可以直接吸收的優質磷素的一種高效解磷菌Bacillus?subtilis?JT-1。?

本發明還要解決的技術問題是提供上述高效解磷菌的應用。?

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案如下：?

一種高效解磷菌，其分類命名為Bacillus?subtilis?JT-1，保藏于中國典型培養物保藏?中心(簡稱CCTCC)，保藏地址：武漢武漢大學，郵編：430072。菌種保藏號為CCTCC?M?2014367，保藏日期為2014年8月5日。是發明人于湖北省宜昌杉樹埡磷礦地區的磷礦土樣中選育的菌株。?

菌株JT-1具有下述性質：?

1、菌落形態學特征：?

在蛋白胨瓊脂培養基上30℃培養2～3天后顯微鏡觀察到營養細胞為單細胞，桿狀，0.5～3×0.5～3μm，有橢圓形芽孢。在上述培養基中30℃培養12h菌體可以大量生長。菌落呈白色，圓形，表面光滑，粘狀，中間凸起。?

2、生理與生化特性：?

(1)培養溫度：25～38℃，最適溫度為30-32℃；?

(2)在pH5.0～9.0范圍內生長；?

(3)革蘭氏染色：陽性；?

(4)VP反應：陽性；?

(5)淀粉水解試驗：陽性；?

(6)硝酸鹽還原反應：陽性；?

(7)檸檬酸利用：陽性；?

(8)明膠液化：陽性；?

(9)苯丙酸脫氨酶試驗：陰性；?

(10)M.R.：陰性；?

(11)脲酶試驗：陰性；?

(12)丙酸鹽利用：陰性；?

3、16S?rDNA序列分析：?

測得16S?rDNA大部分序列1418bp，如SEQ?ID?No：1所示。將所測序列從GeneBank數據庫中的相關種進行比較，構建16S?rDNA全序列為基礎的系統發育樹。結果表明：菌株與枯草芽孢桿菌達到100％同源。所以認定本發明使用的是枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)，具體為枯草芽孢桿菌Bacillus?subtilis?JT-1。?

上述高效解磷菌在土壤解磷中的應用。?

上述高效解磷菌可與有機肥混合使用，也可以單獨使用，改善根際微生物環境，促進植物生長，減少化肥用量。?

將高效解磷菌按如下方法制備成菌劑用于土壤的解磷：?

將斜面保存的解磷菌活化，接種于活化培養基上，培養18～24h；挑取活化培養基上的菌種，接種于發酵培養基中，30～35℃，培養12～24h，得發酵液用于土壤的解磷，或者將發酵液進行干燥處理得到干燥物用于土壤的解磷。?