[發明專利]一種與非梗阻性無精子癥相關的遺傳標記

有效

• 申請號: 201410444435.5
• 申請日: 2014-09-02
• 公開（公告）號: CN104531683B
• 公開（公告）日: 2017-11-07
• 發明（設計）人: 牟麗莎;刁瑞英;謝妮;黃衛人;蔡志明
• 申請（專利權）人: 深圳市第二人民醫院
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司44281
• 代理人: 向武橋,彭家恩

技術領域

本申請涉及男性不育癥檢測領域，尤其涉及非梗阻性無精子癥檢測領域。

背景技術

全球約有10％-15％的育齡夫婦面臨不能生育的問題，其中一半是由于男性不育。原發性無精子癥是造成男性不育的一個非常重要的原因，約影響1％的成年男性。男性不育發病因素具有復雜性和多樣性的特點，包括疾病、營養不良、內分泌紊亂、基因缺陷和環境因素等，其具體發病機制尚不明確，但從家族病例報道和小鼠模型的研究成果中可以推斷遺傳因素起了很大作用。近年來，隨著現代分子生物學技術的發展，人們已發現近200個基因與男性不育癥的發生密切相關；采用基因敲除技術，發現近400個基因與小鼠精子發生密切相關，這些基因的突變、缺失或表達異常，可能是男性不育癥發生的重要原因。大多數基因表達異常可使青春期發育受損，隨后由于下丘腦-垂體對性腺或其基因有重要促進作用的因子缺乏，最終引起男性不育。劑量敏感的性別反轉先天性腎上腺發育不良基因1(Dosage-sensitive sex reversal,adrenal hypoplasia critical region,on chromosome X gene 1,DAX-1)即屬于下丘腦-垂體-性腺軸上的基因，其編碼的蛋白是核受體家族的成員。DAX-1作為一種轉錄因子對垂體促性腺細胞和腎上腺皮質的發育起非常重要的作用。

人類DAX-1基因位于X染色體p21，于1994年克隆成功。該基因編碼的蛋白由470個氨基酸組成，是核受體家族中的一員，主要在下丘腦、垂體、腎上腺以及性腺中表達，對垂體促性腺細胞和腎上腺皮質的發育起非常重要的作用。越來越多的研究表明先天性腎上腺發育不良(Adrenal hypoplasia congenital,AHC)和低促性腺激素性性功能不全(Hypogonadotropic hypogonadism,HH)的發病與DAX-1突變有關。由于DAX-1基因位于Xp上的DSS區，當該區雙拷貝時常伴有46，XY男性的性反轉(女性化)，所以起初DAX-1被認為是卵巢決定基因。但是，隨后的條件敲除研究結果表明它在調節精子發生中起重要作用，敲除后的雄性小鼠表現為性腺機能減退、睪丸發育異常、生精障礙等。Holter等人的研究表明，雄激素受體(Androgen receptor,AR)是DAX-1的一個新的作用靶點，DAX-1通過與AR直接相互作用抑制AR的轉錄活性。

發明內容

本發明提供一種與非梗阻性無精子癥相關的遺傳標記。

本發明提供一種與非梗阻性無精子癥相關的遺傳標記，其核苷酸序列是DAX-1基因的序列，所述序列的突變位點選自c.152 G>A、c.312 C>G、c.725 C>T、c.766 G>C、c.1153 G>T、c.1279 A>G和c.162 G>A中的一個或多個。

前6個突變是錯義突變，第7個突變是同義突變。

上述突變分別是在DAX-1基因序列的第152位點、312位點、725位點、766位點、1153位點、1279位點和162位點。

一種與非梗阻性無精子癥相關的遺傳標記，其核苷酸序列是DAX-1基因的序列，所述序列的突變位點選自c.152 G>A、c.312 C>G、c.725 C>T、c.766 G>C、c.1153 G>T和c.1279 A>G中的一個或多個。

所述突變位點是c.1153 G>T。

檢測所述的遺傳標記的引物對，選自primer 1、primer 2、primer 3或primer 4引物對，其中，所述primer 1引物對的上游引物的序列如SEQ ID NO:1所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO:2所示；所述primer 2引物對的上游引物的序列如SEQ ID NO:3所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO:4所示；所述primer 3引物對的上游引物的序列如SEQ ID NO:5所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO:6所示；所述primer 4引物對的上游引物的序列如SEQ ID NO:7所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO:8所示。

一種非梗阻性無精子癥的檢測試劑盒，能夠特異性識別所述的遺傳標記。該遺傳標志尤其是c.1153 G>T突變。

一種所述的遺傳標記在制備非梗阻性無精子癥檢測試劑盒上的應用。