[發(fā)明專利]陽離子聚合物納米材料基因載體及制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410443813.8
• 申請日: 2014-09-02
• 公開（公告）號: CN105367781B
• 公開（公告）日: 2019-09-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉上峰;李永勇
• 申請（專利權(quán)）人: 上海市口腔病防治院
• 主分類號: C08G65/48
• 分類號: C08G65/48;C12N15/87;A61K47/34;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 崔佳佳;馬莉華

1.一種共聚物，其特征在于，所述共聚物的結(jié)構(gòu)如式Ia所示，

(Ia)

式中，n為40-150，m為0-50，

其中賴氨酸單體單元和組氨酸單體單元可以無規(guī)排列、交替排列，也可以為嵌段形式排列。

2.如權(quán)利要求1所述的共聚物，m為10-30。

3.如權(quán)利要求1或2所述的共聚物，其特征在于，所述共聚物具有以下一個或多個特征：

(1) 聚乙二醇核芯mPEG的分子量為1000-5000g/mol；

(2) 聚賴氨酸嵌段的重復(fù)單元數(shù)為45-120；

(3) 所述共聚物的粒徑為50-100納米；

(4) 所述共聚物的平均水合粒徑為190-210納米，對應(yīng)的電位在5-20mV；

(5) 所述共聚物形成膠束的CMC值為35-50mg/L。

4.如權(quán)利要求1所述的共聚物，其特征在于，n為45-150。

5.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的共聚物的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(i) mPEG-COOH與胱胺反應(yīng)生成mPEG-SS-NH₂；

(ii) 當(dāng)所述共聚物包括聚乙二醇核芯以及與所述聚乙二醇核芯共價連接的聚賴氨酸嵌段時，將mPEG-SS-NH₂和Lys(Cbz)-NCA發(fā)生開環(huán)反應(yīng)，再脫去芐氧羰基保護(hù)基得到所述共聚物；

或者當(dāng)所述共聚物包括聚乙二醇核芯以及與所述聚乙二醇核芯共價連接的聚賴氨酸嵌段和聚組氨酸嵌段時，將mPEG-SS-NH₂和Lys(Cbz)-NCA以及His(Bzl)-NCA發(fā)生開環(huán)反應(yīng)，再脫去芐氧羰基保護(hù)基得到所述共聚物；

其中，Lys(Cbz)-NCA和His(Bzl)-NCA的結(jié)構(gòu)如下所示：

各式中，R₁為；R₂為。

6.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法具有以下一個或多個特征：

(1) 所述步驟(ii)在避光和惰性氣體保護(hù)下進(jìn)行開環(huán)反應(yīng)，所述惰性氣體為氮?dú)?、氬氣、或氦氣?/p>

(2) 所述步驟(ii)在無水有機(jī)溶劑中進(jìn)行開環(huán)反應(yīng)，所述有機(jī)溶劑選自：四氫呋喃、二氧六環(huán)、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮；

(3) 所述步驟(ii)的開環(huán)反應(yīng)溫度為15-30℃；

(4) 所述步驟(ii)的開環(huán)反應(yīng)時間為2-4 天；

(5) Lys(Cbz)-NCA由ε-芐氧羰基-L-賴氨酸與三光氣反應(yīng)制得；

(6) N_α-芐氧羰基-N_im-芐基-L-組氨酸與氯化亞砜反應(yīng)生成His(Bzl)-NCA·HCl，用堿去除鹽酸后得到His(Bzl)-NCA；

(7) 所述步驟(ii)中，在HBr/HAc作用下脫除芐氧羰基保護(hù)基。

7.如權(quán)利要求1所述的共聚物的用途，其特征在于，用于制備基因遞送載體。

8.如權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于，所述基因?yàn)閜DNA或siRNA。

9.一種復(fù)合物，其特征在于，所述復(fù)合物包含：

權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的共聚物；和

核酸。

10.如權(quán)利要求9所述的復(fù)合物，其特征在于，所述復(fù)合物的水合粒徑為100-220nm。

11.如權(quán)利要求9所述的復(fù)合物，其特征在于，所述核酸為pDNA或siRNA。

12.如權(quán)利要求9所述的復(fù)合物，其特征在于，所述共聚物與所述核酸的質(zhì)量比為0.01-10。