[發(fā)明專利]一種魔芋屬植物種質(zhì)資源鑒定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410443194.2
• 申請(qǐng)日: 2014-09-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104198604A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉二喜;馬作江;楊朝柱;鄭小江;陳勇;鄧明才;盛德賢;潘婭妮;降巧龍;牟方貴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種魔芋屬植物種質(zhì)資源鑒定的方法，其特征在于，具體包 括以下步驟：

(1)培養(yǎng)或收集魔芋屬開(kāi)花種質(zhì)資源；

(2)選擇魔芋屬種質(zhì)資源花序的附屬器作為鑒定取用材料的器 官；

(3)于開(kāi)花時(shí)期取用材料；

(4)一定條件下提取魔芋屬種花揮發(fā)成分；

(5)固相微萃取及吸附色譜柱的選擇；

(6)GC-MS測(cè)定條件的優(yōu)化；

(7)將同一屬種多個(gè)重復(fù)測(cè)定的不同魔芋植株花揮發(fā)成分離子 流色譜圖建立在一張色譜圖上，得到同一屬種魔芋揮發(fā)成分及重疊圖 譜；

(8)通過(guò)GC-MS聯(lián)用法分別對(duì)各屬種魔芋花提取的揮發(fā)成分進(jìn) 行分析測(cè)定，獲取各GC-MS總離子流色譜圖；各屬種魔芋花提取的 揮發(fā)成分各具有特異性離子流色譜圖；

(9)分析GC-MS總離子流色譜圖色譜峰對(duì)應(yīng)的化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)， 并用面積歸一法測(cè)定其相對(duì)含量；各屬種魔芋花提取的揮發(fā)成分及相 對(duì)含量不同；

(10)將不同屬種魔芋植株花揮發(fā)成分離子流色譜圖建立在一張 色譜圖上，得到不同屬種魔芋揮發(fā)成分及重疊對(duì)比圖譜，不同屬種魔 芋揮發(fā)成分含量及圖譜不同，從而依據(jù)圖譜確定魔芋品種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，選取 清江花魔芋、楚雄花魔芋、遠(yuǎn)雜1號(hào)、白魔芋、西盟魔芋、滇魔芋6 種魔芋屬開(kāi)花種質(zhì)資源。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，取用 時(shí)期為雌花期，雄花序未成熟，花序附屬器散發(fā)氣味最濃烈時(shí)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(4)中，具體 條件為：取各新鮮采摘的魔芋花序附屬器2.0g于萃取瓶中，在40℃ 恒溫中頂空萃取30min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(5)中，根據(jù) 不同極性吸附色譜柱對(duì)花魔芋揮發(fā)性成分測(cè)定效果，優(yōu)化選擇65μ m?PDMS/DVB固相微萃取頭。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(6)中，氣質(zhì) 聯(lián)用：美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)：(Agilent)GC6890N氣相色譜儀-(Agilent) 5975質(zhì)譜聯(lián)用儀，色譜條件：采用HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱，30 m×0.25mm×0.25μm)、；離子源EI，電子能量70eV，離子源溫度230 ℃，四極桿溫度150℃，進(jìn)樣口溫度為280℃；轉(zhuǎn)接口溫度280℃， 使用全掃描，載氣為高純氦氣，純度>99.999％，不分流進(jìn)樣，流速1 mL/min；柱溫起始為40℃，保持5min，以3℃/min升至210℃，保 持3min，再以15℃/min升至230℃，由GC-MS分析得到的質(zhì)譜數(shù) 據(jù)，經(jīng)計(jì)算機(jī)在NIST05.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)的檢索，確定其化學(xué)成分，同時(shí) 采用峰面積歸一化法定量，得到各組分的相對(duì)含量，結(jié)合保留時(shí)間、 質(zhì)譜、實(shí)際成分和保留指數(shù)等參數(shù)進(jìn)一步確定部分組分。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(7)中，同一 屬種進(jìn)行5株不同魔芋揮發(fā)成分及圖譜測(cè)定。