[發明專利]鰤魚諾卡氏菌誘變弱毒株及其應用

有效

• 申請號: 201410440154.2
• 申請日: 2014-09-02
• 公開（公告）號: CN104232535B
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 夏立群;陳建林;魯義善;簡紀常;蔡佳;張紅蓮
• 申請（專利權）人: 廣東海洋大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/01
• 代理公司: 廣州市南鋒專利事務所有限公司44228
• 代理人: 李慧

技術領域

本發明涉及一種魚類諾卡氏菌的誘變及其應用，具體涉及一種鰤魚諾卡氏菌誘變弱毒株及其應用，屬于菌株誘變技術領域。

背景技術

魚類諾卡氏菌病是池塘養殖、浮筏式網箱養殖和深水網箱養殖模式中的常見病害之一，是一種慢性系統性肉芽腫疾病，鰤魚諾卡氏菌(Nocardia seriolae)是其主要的致病菌。該病能在魚體內及體表形成大量結節，還會引起魚類體表出血及潰瘍，嚴重影響成魚的商品價值，其感染率和死亡率都較高,自然發病率可達到15～30％，嚴重時可達50～60％，平均死亡率約20％，人工感染的死亡率可高達90％～100％。近年來魚類諾卡氏菌病在我國和東南亞地區呈上升趨勢，染病的魚種不斷增加(據不完全統計已有近20種)，造成的經濟損失也日益嚴重。根據已有報道，在我國鰤魚諾卡氏菌感染的魚種既有卵形鯧鲹(Trachinotus ovatus)、大黃魚(Larimichthys crocea)、暗紋東方鲀(Fugu obscurus)、鱸(Lateolabrax japonicus)和花身鯻(Terapon jarbua)等海水魚類，又有烏鱧(Channa maculata)、大口黑鱸(Micropterus salmoides)等淡水魚類。

傳統意義上，治療和預防魚類細菌病主要依賴其菌株敏感性的抗生素。然而，由于諾卡氏菌主要存在于患病魚體的結節中，藥物的臨床應用基本無效，目前尚無該病害的有效防治措施。再加上抗生素的濫用還會引起魚體藥物殘留、造成環境污染、破壞水體有益菌群平衡等更為嚴重的問題。因此，為避免上述問題的產生，且能有效控制該病的發生與流行，我們必須不遺余力地研發出實用性和可操性強的免疫防控新技術，其中首當其沖的是高效疫苗的研制，這代表了當今國際水產業發展的前沿與趨勢。

然而從世界范圍來看，魚類諾卡氏菌疫苗的研發進程不甚理想，因為與其他魚類致病菌不同，研究發現鰤魚諾卡氏菌的多種滅活疫苗基本不能提供免疫保護作用，這使得滅活疫苗的開發路線喪失了可行性。減(弱)毒活疫苗因具有給藥方便(可浸泡給藥)、免疫效價高(可減少給藥劑量)、成本低廉、可開發廣譜疫苗(活菌疫苗往往具有交叉保護性)的技術優勢，已成為當前國際上水產養殖用疫苗研究和開發的熱點和前沿領域。為了打破魚類諾卡氏菌疫苗的研究困境，篩選弱毒株、研制高效安全的鰤魚諾卡氏菌活疫苗應是行之有效的方法。

發明內容

本發明旨在提供一種鰤魚諾卡氏菌誘變弱毒株、相關制劑及應用，具有顯著的低毒效果，同時能有效地保護魚類免受諾卡氏菌病致病菌株或毒力株導致的鰤魚諾卡氏菌的侵害，免疫效果顯著，具有非常好的諾卡氏菌病的防治效果。

為了解決上述問題，本發明所采用的技術方案是：

一株鰤魚諾卡氏菌誘變弱毒株，命名為鰤魚諾卡氏菌NSX1(Nocardia seriolae NSX1)，于2014年7月10日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCC No.9437。

一種免疫組合物，包含上述鰤魚諾卡氏菌弱毒株作為免疫原性組分。本發明免疫組合物中，所述鰤魚諾卡氏菌弱毒株的濃度為10³-10⁹CFU/ml。本發明免疫組合物，還可包含磷酸緩沖液。

鰤魚諾卡氏菌弱毒株可以用于制造抗魚類諾卡氏菌病的藥物。

本發明的有益效果在于：

1.本發明的鰤魚諾卡菌株誘變弱毒株是經過紫外和化學試劑多重誘變，篩選后獲得，相對于野生毒株ZJ0503具有顯著的低毒效果，同時能有效地保護魚類免受諾卡氏菌病致病菌株或毒力株導致的鰤魚諾卡氏菌的侵害，免疫效果顯著，具有非常好的諾卡氏菌病的防治效果；

2.本發明的鰤魚諾卡菌株誘變弱毒株不攜帶任何抗生素抗性標記和其它標記，對環境不存在傳播抗生素抗性的潛在危險；無任何外源性基因片段，極大消除向環境傳播大量毒性病原體的可能性，具有技術上的環境和產品安全性，有實際的商業開發應用價值；

3.本發明的鰤魚諾卡菌株誘變弱毒株為活疫苗的商業化進程提供了現實的開發和應用前景。

具體實施方式

下面通過實施例對本發明做進一步詳細說明，這些實施例僅用來說明本發明，并不限制本發明的范圍。