[發(fā)明專利]一種短小芽孢桿菌活菌制劑的制備工藝

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410436902.X
• 申請日: 2014-08-29
• 公開（公告）號: CN104232529A
• 公開（公告）日: 2014-12-24
• 發(fā)明（設計）人: 陳偉;廖先清;周榮華;饒犇;劉芳;閔勇;張先進;江愛兵;楊自文
• 申請（專利權）人: 湖北省生物農藥工程研究中心
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 朱盛華

1.一種短小芽孢桿菌活菌制劑的制備工藝，其特征在于具體步驟如下：

1)一級種子培養(yǎng)：5000ml三角瓶中裝有2000ml一級種子培養(yǎng)基，115℃-121℃濕熱滅菌15-30min,取10ml短小芽孢桿菌活菌凍干管菌種接種于一級種子培養(yǎng)基中，在28℃-30℃培養(yǎng)10～12h；一級種子培養(yǎng)所用培養(yǎng)基的原料及用量為：葡萄糖0.5％-2.5％，牛肉膏0.5％-3％，蛋白胨0.5％-3％，培養(yǎng)基pH為6.5-7.5；

2)二級種子培養(yǎng)：在400L發(fā)酵罐中裝有150L或300L二級種子培養(yǎng)基，115℃-121℃濕熱滅菌15-30min,將3000ml長好的一級種子接種于二級種子培養(yǎng)基中；在28℃-30℃培養(yǎng)10～12h；二級種子培養(yǎng)所用培養(yǎng)基的原料及用量為：葡萄糖0.5％-2.5％，酵母抽提物0.5％-3％，蛋白胨0.5％-2.5％，磷酸氫二鉀0.02％-0.05％，氯化鈉0.5％-1％，硫酸鎂0.02％-0.1％，培養(yǎng)基pH調為6.5-7.5；

3)發(fā)酵：在5m³或40m³發(fā)酵罐中裝有4000L或30m³短小芽孢桿菌活菌發(fā)酵培養(yǎng)基，115℃-121℃濕熱滅菌15-30min,將150L或300L長好的二級種子接種于短小芽孢桿菌活菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，控制罐壓0.02Mpa-0.05Mpa，在28℃-32℃培養(yǎng)30-33h；發(fā)酵所用培養(yǎng)基的原料及用量為：葡萄糖1％-2％，豆粕1％-3％，玉米漿1％-3％，酵母粉1％-3％，磷酸氫二鉀0.01％-0.05％，硫酸鎂0.1％-0.2％，硫酸錳0.002％，培養(yǎng)基pH為6.5-7.5；

4)補料：當發(fā)酵至8-10h開始流加由葡萄糖20％-60％、水40％-80％配制成的葡萄糖補料培養(yǎng)基，發(fā)酵至24-28小時結束；

5)至芽孢形成率大于等于90％時，結束發(fā)酵；

6)將發(fā)酵液加熱到35℃-60℃時進入濃縮器，在真空度為-70kpa-95kpa下進行濃縮，濃縮至含固量達到10％-25％時，開始出料；

7)濃縮發(fā)酵液用多級低溫噴霧流化干燥設備進行干燥造粒，顆粒經過分選，符合顆粒要求直接出塔，得CFU不少于3.0×10¹¹個的短小芽孢桿菌產品；所述進風溫度130-180℃，出口溫度60-80℃；

8)尾氣處理：采用化學氧化、等離子照射或紫外照射去味、脫氨氮或脫硫化氫處理后排放。

2.根據權利要求1所述的一種短小芽孢桿菌活菌制劑的制備工藝，其特征在于一、二級種子培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基，補料培養(yǎng)基經濕熱滅菌后，培養(yǎng)基要迅速降至30℃。

3.根據權利要求1所述的一種短小芽孢桿菌活菌制劑的制備工藝，其特征在于濃縮器為MVR濃縮器、降膜蒸發(fā)器或板式蒸發(fā)濃縮器。

4.根據權利要求1所述的一種短小芽孢桿菌活菌制劑的制備工藝，其特征在于采用MVR濃縮器，從蒸發(fā)室出來的二次蒸汽經壓縮機壓縮，壓力溫度升高至100℃-115℃，送至加熱室當加熱蒸汽使用，加熱發(fā)酵液至進料溫度，加熱蒸汽本身冷凝成水。