[發明專利]降解5環和6環多環芳烴的菌株及其獲取方法、應用

有效

• 申請號: 201410432413.7
• 申請日: 2014-08-26
• 公開（公告）號: CN104388328B
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發明（設計）人: 楊志新;趙歐亞;李玉靈;馮圣東;石維;王偉;王小敏;李成
• 申請（專利權）人: 河北農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及環境污染物生物處理技術領域，尤其涉及一種降解5環和6環多環芳烴的菌株及其獲取方法、應用。

背景技術

多環芳烴(PAHs)是一類廣泛分布并穩定存在于自然環境中的含2個或2個以上苯環的有毒有機污染物。由于其具有“三致(致癌、致畸、致突變)效應，還會產生光致毒效應，且其在土壤中具有隱弊性大、潛伏期長、涉及面廣、治理困難等特點，尤其是高環PAHs，不僅化學結構復雜、電子云密度高、很難被氧化，而且水溶性差、熱穩定性強、固水分配系數高、生物可利用性低，帶來的環境污染問題日益突出，從而倍受環境科學家的關注，對人類健康和生態環境具有很大的潛在危害。美國環保局在20世紀80年代初就將16種PAHs列為環境中優先監測污染物，我國也將PAHs列入環境優先檢測的污染物黑名單中。多環芳烴已造成許多重點工礦企業內部和周邊土壤的嚴重污染，在一些重工業污染區，每千克土壤中PAHs含量可達上萬微克。在農業污灌區同樣存在污染問題，研究表明，沈撫灌區土壤表層16種優先控制PAHs的平均含量達2.22mg/kg，亞表層為0.75mg/kg；無論表層還是亞表層，多環芳烴均以4環和5環為主，其在總PAHs中所占比例均在34％以上。

為了保護生態系統和人體健康，有必要對PAHs污染土壤進行修復。可采用的修復方法包括物理法(如土壤蒸汽浸提、熱脫附)、化學法(如化學氧化、土壤淋洗)、以及生物法(如微生物修復、植物修復)。生物修復是指利用特定的生物吸收、轉化、清除或降解環境污染物，從而修復被污染環境或消除環境中污染物，實現環境凈化。相對于物理修復和化學修復還具有諸多優點，如費用低、效果好、不產生二次污染等，是一類低耗、高效和環境安全的環境生物技術，具有良好發展潛力。因此，對多環芳烴污染的生物修復進行研究是非常具有實際意義的。

微生物修復技術能有效的去除污染土壤中的低環PAHs，但可降解高環PAHs的優勢菌株很少，尤其五環以上則更少。迄今為止，學者們已經分離出許多可以降解多環芳烴的微生物，其中細菌占主要地位。已經富集分離并鑒定的降解高環PAHs的細菌主要包括：鞘氨醇菌屬(Sphingomonas sp.)、假單胞菌屬(Pseudomonas sp.)和分枝桿菌屬(Mycobacterium sp.)。其中，大多數降解菌能以四環PAHs為唯一碳源和能源生長，且可參與更高環PAHs的共代謝降解過程。以往降解芳烴的細菌大多都是針對低分子量的多環芳烴，對5環和6環多環芳烴的降解效果不甚理想，尤其針對以煤礦區PAHs污染的土壤為介質的降解菌篩選工作尚未見有報道。因此，以河北唐山煤礦區PAHs污染的土壤為研究介質，篩選5環和6環多環芳烴的高效降解菌，對于土壤PAHs污染的微生物修復具有重要的現實意義。

發明內容

本發明的實施例提供一種降解5環和6環多環芳烴的菌株、及其獲取方法、應用，可以高效地降解5環和6環多環芳烴。

為達到上述目的，本發明的實施例采用如下技術方案：

一種降解5環和6環多環芳烴的菌株，所述菌株名稱為鮑氏不動桿菌(Acinetobacter baumannii)ZH-L8；

所述鮑氏不動桿菌ZH-L8形態特征為：固體培養基上生長呈圓形乳白色菌落，邊緣光滑；顯微鏡下觀察為桿狀；細胞呈革蘭氏陽性桿狀，側面平行，兩端鈍圓；菌落圓形，邊緣光滑，菌落與培養基緊貼，白色、不透明；

生理生化特性為：細菌在20-45℃范圍內生長良好、在pH 5.7、6.8下生長良好；耐鹽濃度為5％；甲基紅陽性；接觸酶陽性；v-p陰性，v-p液最終pH＜6；精氨酸利用陽性；硝酸鹽利用陽性；D-葡萄糖產酸、乳糖產酸、蔗糖產酸陽性；淀粉水解陽性；硝酸鹽還原陽性；卵黃卵磷脂酶陽性；酪氨酸水解陽性；檸檬酸鹽利用陽性；D-甘露醇產酸、明膠液化陰性、苯丙氨酸脫氫酶皆陰性；不產吲哚；兼性厭氧。

一種上述的菌株的獲取方法，包括以下步驟：

(1)從唐山煤礦區周圍的草地，按照梅花型取樣方法取0-10cm表層混合樣1份，取樣完成后，在24小時內迅速進行下述步驟篩選出所述菌株；

(2)富集：取1g所述混合樣，采用無機鹽液體培養基獲得富集菌液，取1mL富集菌液接種到LB培養基中進行培養；