[發明專利]一種新菌株及其獲取方法、應用

在審

• 申請號: 201410432336.5
• 申請日: 2014-08-26
• 公開（公告）號: CN104357331A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 楊志新;李玉靈;趙歐亞;馮圣東;王偉;石維;嚴愛華
• 申請（專利權）人: 河北農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;B09C1/10;C12R1/77
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種新菌株，其特征在于，所述新菌株保藏名稱為：ZH-H2，分類名稱為：Fusarium?dlaminii，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期：2014年06月11日，保藏號：CGMCC?No.9316。

2.根據權利要求1所述的新菌株，其特征在于，所述新菌株在馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基PDA培養基上30℃培養4d后，菌落直徑為3.2cm；菌株產生紫色色素，基物表面黃色，背面色深，培養基無色，菌絲生長致密，菌落表面棉絮狀；分生孢子鐮刀形，略彎曲，兩端漸尖，0-3個分隔，多數無隔，產孢細胞單瓶梗；厚垣孢子球形。

3.一種權利要求1-2所述的新菌株的獲取方法，其特征在于，包括以下步驟：

采樣：從唐山煤礦區周圍的草地，按照梅花型取樣方法取0-10cm表層混合樣1份，取樣完成后，在24小時內迅速進行下述步驟篩選出所述新菌株；

富集：取1g所述混合樣，采用無機鹽液體培養基獲得富集菌液，取1mL富集菌液接種到高氏一號培養基中進行培養；

其中，所述無機鹽液體培養基包括：MgSO₄.7H₂O0.2g、CaCl₂.2H₂O0.02g、FeSO₄.7H₂O0.01g、KH₂PO₄0.4g、Na₂HPO₄0.6g、MnSO₄.H₂O0.02g?NH₄NO₃1.0g、蒸餾水1L；高氏一號培養基包括：可溶性淀粉2g、氯化鈉0.05g、硝酸鉀0.11g、磷酸氫二鉀0.05g、硫酸鎂0.05g、硫酸亞鐵0.001、瓊脂1.5-2g、蒸餾水100ml，pH7.4-7.6；

篩選與純化：將上述在高氏一號培養基中培養后的富集菌液經含PAHs的無機鹽培養基進行篩選，并經多次轉接純化后，獲得多株純菌；

馴化：將已篩選出的所有純菌接種到表層含120ug?PAHs的無機鹽固體培養基中進行沖擊，30℃下培養7d后觀察菌落生長狀況，得到目標降解菌株；所述無機鹽固體培養基包括：MgSO₄.7H₂O0.2g、CaCl₂.2H₂O0.02g、FeSO₄.7H₂O0.01g、KH₂PO₄0.4g、Na₂HPO₄0.6g、MnSO₄.H₂O0.02g?NH₄NO₃1.0g、瓊脂15～20g、蒸餾水1L；

將所述目標降解菌株接種到表層含5環以上單體PAHs12ug、24ug、48ug的無機鹽固體培養基中進行逐級馴化，30℃下恒溫培養7d后，生長良好，將馴化后的菌株用甘油冷凍保存；

降解：目標降解菌株經接種至含5環單體PAHs的無機鹽液體培養基中驗證其降解能力，最后得到一株能夠降解5環以上PAHs單體的高效降解菌株ZH-H2。

4.一種權利要求1-2所述的新菌株的應用，其特征在于，包括：所述新菌株用于降解5環以上多環芳烴，其中所述5環以上多環芳烴為苯并(k)熒蒽、二苯并(a，h)蒽、苯并(a)芘、茚并(1，2，3-cd)芘、苯并(g，h，i)苝。

5.一種權利要求1-2所述的新菌株的應用，其特征在于，包括：所述新菌株用于降解8種多環芳烴混合物；其中所述8種多環芳烴混合物包括：芘、屈、苯并(a)蒽、苯并(k)熒蒽、二苯并(a，h)蒽、苯并(a)芘、茚并(1，2，3-cd)芘、苯并(g，h，i)苝。

6.一種權利要求1-2所述的新菌株的應用，其特征在于，包括：所述新菌株在添加淀粉的情況下用于降解8種多環芳烴混合物。