[發明專利]一種穩定高效的草莓種質資源離體保存及恢復生長的方法

有效

• 申請號: 201410424013.1
• 申請日: 2014-08-25
• 公開（公告）號: CN104782482B
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 于紅梅;王靜;趙密珍;袁華招;錢亞明
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種穩定高效的草莓種質資源離體保存及恢復生長的方法，其特征在于，具體方法包括(1)無菌苗的獲得(2)生長培養(3)抑制生長(4)低溫保存(5)檢查恢復培養(6)生根移栽，其步驟如下：

(1)無菌苗的獲得：是從植株上剪取新長出來的匍匐莖莖尖經流水沖洗1.5-2h，在無菌操凈工作臺上，先用75％醫用酒精消毒30s，然后再用0.1％升汞水消毒8min，最后無菌水沖洗3-4次后剝去外層苞片，將莖尖接種在培養基①或②上，置于25±2℃、光照強度2400lx、每天光照時間14～16h的培養室中進行初代培養，25天獲得無菌苗；

(2)生長培養：取上述無菌苗，切取帶1至2葉的莖尖接種在裝有培養基①或②的組織培養袋中，后將培養袋置于上述相同條件下培養14天，促進莖尖生長；

(3)抑制生長：生長培養結束后，置于22℃，光照強度2400lx，縮短光照至8h的培養室中培養10天；

(4)低溫保存：抑制生長結束后，置于4℃冰箱中弱光保存，光照強度400lx；

(5)檢查恢復培養：每隔6個月，對保存的材料進行檢查，對生長不好的進行恢復培養；

(6)生根移栽：將上述保存達22～24個月的材料置于(3)抑制生長條件下培養5天，然后轉接③或④上置于(1)生長培養條件下生根培養25天，煉苗移栽；

其中，所述的培養基①是指1/2MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+30g/L蔗糖+6.2g/L瓊脂，pH＝5.8的培養基，用于野生資源的分化與保存，培養基②是指MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+30g/L蔗糖+6.2g/L瓊脂，pH＝5.8的培養基，用于栽培資源分化與保存，培養基③是指1/2MS+30g/L蔗糖+6.2g/L瓊脂，pH＝5.8的培養基，用于野生資源生根，培養基④是指MS+30g/L蔗糖+6.2g/L瓊脂，pH＝5.8的培養基，用于栽培資源生根。

2.根據權利要求1所述的一種穩定高效的草莓種質資源離體保存及恢復生長的方法，其特征在于：所述的組織培養袋是指一種專門用于組織培養專用袋，此類組培專用袋具有耐高溫滅菌和低溫存放的特點，每袋具有五個子袋構成。