[發(fā)明專利]核酸序列測定方法及裝置、核酸序列測定用元件及其制造方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410423060.4 | 申請日： | 2014-08-25 |
| 公開（公告）號： | CN104419765A | 公開（公告）日： | 2015-03-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 蓼沼崇;田口朋之;田名網(wǎng)健雄 | 申請（專利權(quán)）人： | 橫河電機(jī)株式會社 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12M1/00;C12M1/34 |
| 代理公司： | 北京信慧永光知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11290 | 代理人： | 周善來;李雪春 |
| 地址： | 日本*** | 國省代碼： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 核酸 序列 測定 方法 裝置 元件 及其 制造 | ||
1.一種核酸序列測定方法，其特征在于，
所述核酸序列測定方法包括：
制備含有對象核酸的樣品溶液；
將所述樣品溶液提供給核酸序列測定用元件；以及
測量來自所述核酸序列測定用元件的熒光，
所述核酸序列測定用元件包括：
熒光探針，具有結(jié)合部以及基端，并且在規(guī)定的位置附加有熒光分子；
消光探針，具有結(jié)合部以及基端，并且在規(guī)定的位置附加有消光物質(zhì)；以及
基板，具有固相面，在所述固相面上固定有所述熒光探針以及所述消光探針各自的基端，
所述熒光探針的結(jié)合部和所述消光探針的結(jié)合部具有相互互補(bǔ)的核酸序列，
所述熒光探針和所述消光探針中的至少一方具有檢測部，所述檢測部具有與特定的核酸序列互補(bǔ)的核酸序列，
具有下述位置關(guān)系的所述熒光探針以及所述消光探針各自的基端固定于所述固相面，所述位置關(guān)系為：當(dāng)所述對象核酸和所述檢測部的雜交未產(chǎn)生時(shí)，來自所述熒光分子的熒光被接近了所述熒光分子的所述消光物質(zhì)消光，通過借助了所述結(jié)合部的、所述熒光探針和所述消光探針的結(jié)合被維持，由此所述消光物質(zhì)接近了所述熒光分子，當(dāng)所述對象核酸和所述檢測部的雜交產(chǎn)生了時(shí)，遠(yuǎn)離了所述消光物質(zhì)的所述熒光分子呈現(xiàn)熒光，通過借助了所述結(jié)合部的、所述熒光探針和所述消光探針的結(jié)合被解除，由此所述熒光分子遠(yuǎn)離了所述消光物質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸序列測定方法，其特征在于，在所述樣品溶液的存在下，對來自所述核酸序列測定用元件的熒光進(jìn)行測量。
3.一種核酸序列測定用元件，其對樣品溶液中所含的對象核酸的核酸序列進(jìn)行測定，所述核酸序列測定用元件的特征在于，
所述核酸序列測定用元件包括：
熒光探針，具有結(jié)合部以及基端，并且在規(guī)定的位置附加有熒光分子；
消光探針，具有結(jié)合部以及基端，并且在規(guī)定的位置附加有消光物質(zhì)；以及
基板，具有固相面，在所述固相面上固定有所述熒光探針以及所述消光探針各自的基端，
所述熒光探針的結(jié)合部和所述消光探針的結(jié)合部具有相互互補(bǔ)的核酸序列，
所述熒光探針和所述消光探針中的至少一方具有檢測部，所述檢測部具有與特定的核酸序列互補(bǔ)的核酸序列，
具有下述位置關(guān)系的所述熒光探針以及所述消光探針各自的基端固定于所述固相面，所述位置關(guān)系為：當(dāng)所述對象核酸和所述檢測部的雜交未產(chǎn)生時(shí)，來自所述熒光分子的熒光被接近了所述熒光分子的所述消光物質(zhì)消光，通過借助了所述結(jié)合部的、所述熒光探針和所述消光探針的結(jié)合被維持，由此所述消光物質(zhì)接近了所述熒光分子，當(dāng)所述對象核酸和所述檢測部的雜交產(chǎn)生了時(shí)，遠(yuǎn)離了所述消光物質(zhì)的所述熒光分子呈現(xiàn)熒光，通過借助了所述結(jié)合部的、所述熒光探針和所述消光探針的結(jié)合被解除，由此所述熒光分子遠(yuǎn)離了所述消光物質(zhì)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸序列測定用元件，其特征在于，所述熒光探針具有所述檢測部。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸序列測定用元件，其特征在于，所述基板是平板，所述固相面是所述平板的一個(gè)平面。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸序列測定用元件，其特征在于，所述基板是球體，所述固相面是所述球體的球面。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸序列測定用元件，其特征在于，所述結(jié)合部的至少一部分作為所述檢測部發(fā)揮作用。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸序列測定用元件，其特征在于，所述消光探針的數(shù)量多于所述熒光探針的數(shù)量。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的核酸序列測定用元件，其特征在于，所述熒光探針的數(shù)量與所述消光探針的數(shù)量之比為1:3。
10.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸序列測定用元件，其特征在于，附加有所述熒光分子以及所述消光物質(zhì)的所述規(guī)定的位置，分別是所述熒光探針以及所述消光探針的中途。
11.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸序列測定用元件，其特征在于，附加有所述熒光分子以及所述消光物質(zhì)的所述規(guī)定的位置有多個(gè)。
12.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸序列測定用元件，其特征在于，所述熒光探針以及所述消光探針雙方具有所述檢測部。
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