[發明專利]催化法生產低分子硫酸軟骨素的方法

有效

• 申請號: 201410422241.5
• 申請日: 2014-08-26
• 公開（公告）號: CN104177512A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 劉榜惠
• 申請（專利權）人: 淮安麥德森制藥有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08
• 代理公司: 淮安市科翔專利商標事務所 32110
• 代理人: 韓曉斌

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種催化法生產低分子硫酸軟骨素的方法。

背景技術

硫酸軟骨素，英文名chondroitin?sulfate，是以動物（豬、牛、馬、羊、雞、鯊魚等）的軟骨為原料的一種高分子酸性粘多糖，其分子結構為β-D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖通過β1→3糖苷鍵形成的重復二糖單位所組成的多糖鏈。它是一種白色或微黃色粉末，吸水性強，易溶于水而成粘稠液體，不溶于酒精、丙酮、乙醚和氯仿等有機溶劑。其鹽類對熱較穩定。硫酸軟骨素的生物活性，隨分子量而不同。其藥理活性與分子量有密切關系，分子量的大小對口服后腸胃吸收率的影響也十分明顯。普通軟骨素產品分子量一般在20000～50000道爾頓之間，且分子量波動大，口服吸收差、生物利用度低、治療不穩定。有實驗表明，低分子量的硫酸軟骨素產品的體內吸收明顯優于普通分子量的產品，分子量越小吸收率越高。美國專利USP3405120已經證明，分子量在3500-5300道爾頓時，硫酸軟骨素的藥理活性最強，對防治動脈粥樣硬化、風濕性炎癥和傷口愈合等具有更好的療效。

目前，低分子硫酸軟骨素通常提取方法是采用酸水解法、酶解法以及催化氧化法，主要包括以下步驟：

1）????堿提、酶解：原料（軟骨）加水浸沒，用氫氧化鈉調pH8.5，升溫至55-60℃，保溫4-6小時，然后加入1-2%的堿性蛋白酶，保持pH8.5，保溫55-60℃攪拌6-8小時，升溫至沸騰15分鐘左右，過濾，得濾液；

2）????酒精沉淀：濾液中加入3%重量的氯化鈉，降溫至室溫，按體積的2.5倍加入95%酒精，靜止8小時，取沉淀；

3）????降解：按沉淀：水的重量比為1：20的比例混合水，同時加入3%重量的氯化鈉，調pH1-2，或高溫加入4-6%重量雙氧水，或用專用酶酶解，過濾，取濾液；

4）????酒精沉淀、干燥：濾液調pH6，加入體積的2.5倍量酒精第二次沉淀，沉淀再用95%酒精脫水兩次，干燥粉碎得到低分子硫酸軟骨素成品。

低分子硫酸軟骨素生產過程中主要應用酸解、酶解或氧化方法使硫酸軟骨素的糖苷鍵斷裂制備低分子硫酸軟骨素，而酸水解硫酸軟骨素反應條件劇烈且不容易控制，酶解法成本高不適宜規模生產，而普通催化氧化法條件劇烈，反應后溶液殘留金屬離子催化劑較多，溶液中雜質過多，需要離子交換才能去除完全，影響產品分離純化，操作復雜。?

發明內容

本發明有目的在于：提供一種催化法生產低分子硫酸軟骨素的方法，操作過程簡單，催化條件容易控制，適合連續規模化生產。

本發明的技術解決方案是該催化法生產低分子硫酸軟骨素的方法包括下列步驟：

（1）水煮：軟骨原料加水浸沒，升溫至80-100℃，煮12-24小時，使附在軟骨表面的肌肉組織剝離，撈出軟骨；

（2）蒸煮：將步驟（1）得到的水煮軟骨放入釜中，100℃蒸4小時以上，上層油脂收集；

（3）酶解：將步驟（2）得到的軟化軟骨加水浸沒，按水體積的3%加氯化鈉，用堿調pH至8-9，升溫至55-60℃，再加入水體積的1-2%2709堿性蛋白酶，保持pH8-9，保溫55-60℃攪拌4-6小時，升溫至沸騰12-18分鐘，過濾；?

（4）酒精沉淀：將步驟（3）得到的濾液調pH6-7，再加入酒精使溶液酒精質量濃度達到60%，沉淀16小時以上；

（5）催化：將步驟（4）得到的沉淀物用水溶解，升溫至40-60℃，調pH至6-7，加入水體積的1-3%雙氧水，溶液泵入具有催化活性的催化劑Cu/ZSM-5分子篩的容器中，溫度控制40-60℃；

（6）超濾：將步驟（5）得到的催化溶液，用2000分子量的超濾膜濃縮；

（7）酒精沉淀：將步驟（6）得到的濃縮液，調pH6-7，加其體積5%的氯化鈉，再加入酒精使溶液酒精質量濃度達到60%，沉淀16小時以上；

（8）脫水烘干：步驟（7）沉淀結束后棄去上層酒精，收集沉淀，脫水干燥，得硫酸軟骨素成品。

其中，步驟（5）的催化用催化劑為Cu/ZSM-5分子篩，銅離子化合物占分子篩ZSM-5的質量為10-20%。

其中，步驟（8）的焙烤溫度500-650℃，焙烤時間4-8小時。