[發明專利]抗菌肽MP1106、其制備方法及應用

在審

• 申請號: 201410419231.6
• 申請日: 2014-08-22
• 公開（公告）號: CN104250293A
• 公開（公告）日: 2014-12-31
• 發明（設計）人: 王建華;曹鑫濤;張勇;滕達;王秀敏;毛若雨
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院飼料研究所
• 主分類號: C07K14/37
• 分類號: C07K14/37;C12N15/31;C12N15/81;C12N1/19;C12P21/02;A61K38/16;A61P31/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.抗菌肽MP1106，其氨基酸序列如Seq?ID?No.1所示。

2.編碼權利要求1所述抗菌肽MP1106的基因，其核苷酸序列如Seq?ID?No.2所示。

3.含有抗菌肽MP1106編碼基因的表達載體，其特征在于，所述表達載體包括誘導型啟動子、位于啟動子下游的編碼α-因子分泌信號肽的核苷酸序列以及編碼權利要求1所述抗菌肽MP1106的DNA序列。

4.根據權利要求3所述的表達載體，其特征在于，出發載體為pPICZαA。

5.根據權利要求4所述的表達載體，其特征在于，抗菌肽MP1106編碼基因的表達框位于載體的多克隆位點區的Xho?Ⅰ和Xba?Ⅰ兩個限制性酶切位點之間，在Xho?Ⅰ酶切位點下游是Kex2基因表達產物切割識別序列AAGAGA，在Kex2切割位點后依次為誘導型啟動子、位于啟動子下游的編碼α-因子分泌信號肽的核苷酸序列以及如Seq?ID?No.2所示的編碼抗菌肽MP1106的DNA序列，后面連接兩個終止密碼子，另外，在Xho?Ⅰ和Xba?Ⅰ兩個酶切位點外側還設有酶切位點保護堿基。

6.含有權利要求3-5任一項所述表達載體的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為畢赤酵母。

7.根據權利要求6所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為畢赤酵母X-33。

8.權利要求7所述宿主細胞的培養方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：1)種子液的制備；2)種子液接種和菌體生長階段；3)補加葡萄糖菌體生長階段；4)甲醇誘導階段。

9.一種在重組畢赤酵母中表達抗菌肽MP1106的方法，其是利用權利要求3-5任一項所述表達載體轉化畢赤酵母，獲得的重組畢赤酵母經過發酵培養，分泌產生抗菌肽MP1106。

10.權利要求1所述抗菌肽MP1106在抗金黃色葡萄球菌中的應用。