[發(fā)明專利]動物源基體藥物及其代謝物殘留凍干粉標(biāo)準(zhǔn)樣品制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410418903.1
• 申請日: 2014-08-22
• 公開（公告）號: CN104155162A
• 公開（公告）日: 2014-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊麗君;王靜;胡巧茹;劉玉敏;李兆杰;梁君妮;王美玲;宋曉華
• 申請（專利權(quán)）人: 威海出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/42
• 代理公司: 青島高曉專利事務(wù)所 37104
• 代理人: 宋文學(xué)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物殘留檢測的動物源基體標(biāo)準(zhǔn)樣品技術(shù)領(lǐng)域，具體是以常見的獸藥對動物進(jìn)行養(yǎng)殖，獲得相當(dāng)藥物濃度的動物基體，真空冷凍干燥成凍干粉標(biāo)準(zhǔn)樣品的方法。

背景技術(shù)

典型的獸藥是指用于預(yù)防和治療畜禽疾病的藥物。但是，隨著集約化養(yǎng)殖生產(chǎn)的開展，一些化學(xué)的、生物的藥用成分被開發(fā)成具有某些功效的動物保健品或飼料添加劑，也屬于獸藥的范疇。獸藥的主要用途有防病治病、促進(jìn)生長、提高生產(chǎn)性能、改善動物性食品的品質(zhì)等。獸藥殘留是指獸藥的原形化合物及其代謝物在動物的細(xì)胞、組織、器官或可食性產(chǎn)品（如奶、蛋）中的蓄積、貯存，除獸藥外還包括非法使用違禁藥物如克倫特羅、己烯雌酚、蘇丹紅、三聚氰胺等在動物體內(nèi)的殘留，以及通過食物鏈進(jìn)入動物體內(nèi)的農(nóng)藥（如殺蟲劑、除草劑等）和環(huán)境污染物(如重金屬、霉菌毒素等)。常見的獸藥殘留種類有抗生素類藥物?、磺胺類藥物、硝基呋喃類藥物、氯霉素類藥物、三苯甲烷類染料、砷制劑如硝苯砷酸和洛克沙砷、抗寄生蟲類藥物如苯并咪唑、左旋咪唑、克球酚、吡喹酮等、激素類藥物如孕酮、睪酮、雌二醇等。

在國際上，一種獸藥殘留量的分析方法需要經(jīng)3種類型的樣品測試：受控組織或液體、用藥物強(qiáng)化至或接近最大容許水平(MRL)的樣品和本身具有藥物殘留的組織樣品，從而保證分析方法能具有一定的樣品基質(zhì)適用范圍和重復(fù)性。目前國內(nèi)殘留分析實(shí)驗(yàn)室由于常常無法獲得實(shí)際污染樣品，往往以添加獸藥標(biāo)準(zhǔn)溶液至分析樣品中進(jìn)行質(zhì)控，這樣不能真實(shí)地重現(xiàn)藥物經(jīng)過自然代謝后在動物體內(nèi)的提取效率，無法反映方法的準(zhǔn)確性，得到的檢測結(jié)果也就不足以令人信服。歐盟對獸藥殘留分析方法與結(jié)果表達(dá)的法規(guī)2002/657/EC中明確指出了需要采用標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行過程控制，國外殘留分析實(shí)驗(yàn)室已普遍使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制和結(jié)果評判，主要由歐共體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和測量研究所(IRMM)、英國弗帕斯檢測技術(shù)研究所(FAPAS)等提供，相關(guān)樣品也已產(chǎn)業(yè)化，但由于國外標(biāo)準(zhǔn)樣品或質(zhì)控樣品價格非常昂貴，且存在運(yùn)輸問題，國內(nèi)的殘留分析實(shí)驗(yàn)室無法定期使用其進(jìn)行質(zhì)控。本發(fā)明可以成功研制我國的動物源基體殘留標(biāo)準(zhǔn)樣品，應(yīng)用到殘留分析的質(zhì)控過程中，將會普遍降低檢測成本，是提高我國殘留分析實(shí)驗(yàn)室的檢測水平、實(shí)現(xiàn)檢測的等效性、與國際同領(lǐng)域接軌的有效手段之一。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種動物源基體藥物及其代謝物殘留凍干粉標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法。對實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行藥物飼養(yǎng)，藥物飼養(yǎng)方式為飼喂、注射或藥浴一種或多種藥物，控制養(yǎng)殖時間，經(jīng)動物體代謝，獲得含有原藥及代謝物（如果有）的樣品材料，加維生素C溶液勻漿制成肉糜，真空冷凍干燥，粉碎過篩，根據(jù)基質(zhì)中脂肪含量含或不含脫脂重新混勻步驟，在厭氧工作站中充氮?dú)庋b瓶，真空封裝，制備成一種均勻性好、穩(wěn)定性好、易保存且目標(biāo)物和基體結(jié)合情形與真實(shí)檢測樣品一致的標(biāo)準(zhǔn)樣品。?

所述動物基體標(biāo)準(zhǔn)樣品中的獸藥濃度約0-100ug/kg，同一標(biāo)準(zhǔn)樣品有多殘留時將藥物濃度保持在同一數(shù)量級。

所述動物基體包括豬、牛、雞、魚、蝦。

所述藥物飼養(yǎng)包括飼喂（將藥物拌在料中喂食，如豬、牛、雞）、藥浴（將藥放入水中，如魚、蝦）、注射（將藥物進(jìn)行肌肉注射，如豬、牛、雞）。

所選包裝方式為充氮包裝后真空封裝。將厭氧工作站內(nèi)滅菌、氮?dú)鉂舛日{(diào)整到99%備用。先將包裝瓶放入無菌室用紫外燈滅菌，在無菌室內(nèi)將干粉準(zhǔn)確稱量到瓶中，扣上蓋子不擰，將所有裝好干粉樣品的包裝瓶分批移入?yún)捬豕ぷ髡局校匦聦捬豕ぷ髡镜獨(dú)鉂舛日{(diào)整至99%，在厭氧工作站內(nèi)擰緊包裝瓶的蓋子，完成充氮包裝取出。再用鋁箔袋將包裝瓶進(jìn)行真空封裝。

所述獸藥包括：a.磺胺類藥物：磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺吡啶、磺胺噻唑等；b.喹諾酮類藥物：諾氟沙星、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、氧氟沙星、培氟沙星、二氟沙星、達(dá)諾沙星、馬波沙星、氟甲喹等；c.硝基呋喃類藥物：呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因等；d.氯霉素類藥物：氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考等；e.三苯甲烷類染料：結(jié)晶紫、孔雀石綠等；f.砷制劑：阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷等；g.抗寄生蟲類藥物：甲硝唑、苯并咪唑、左旋咪唑、伊維菌素、阿維菌素、多拉菌素、克球酚、吡喹酮、地克珠利、妥曲珠利、氯羥吡啶等；h.?β興奮劑藥物：克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、噴布特羅、特布它林、齊帕特羅等；i激素類藥物：孕酮、睪酮、雌二醇等；j.四環(huán)素族藥物：土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素。

動物源基體藥物及其代謝物殘留凍干粉標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征在于包括以下步驟：