[發明專利]水中懸浮顆粒物上痕量沙拉沙星萃取富集和定量的方法

有效

• 申請號: 201410416719.3
• 申請日: 2014-08-22
• 公開（公告）號: CN104181259A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 徐勇鵬;崔福義
• 申請（專利權）人: 哈爾濱工業大學
• 主分類號: G01N30/08
• 分類號: G01N30/08;G01N30/02
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明屬于環境監測技術領域，涉及一種水環境中沙拉沙星的檢測方法，具體涉及一種水中顆粒物上沙拉沙星萃取富集的定量方法。

背景技術

沙拉沙星屬于第三代喹諾酮類抗生素藥物，是繼恩諾沙星之后的又一新的畜禽專用抗菌藥，具有廣譜抗菌作用，對革蘭氏陽性和陰性菌具有顯著的殺滅作用，對霉形體和某些厭氧菌也有效。大量用于畜禽消化系統、呼吸系統、泌尿系統感染和霉形體病的治療。

有報道說，沙拉沙星在動物體內沒有完全代謝，排泄物中仍然有沙拉沙星的殘留，通過排泄物流入水環境中。近些年，國內外水環境中痕量沙拉沙星的報道很多，濃度由ng/L到μg/L?的量級，這些水環境中的沙拉沙星，最終通過取水進入到飲用水系統中，有效降解水中沙拉沙星的技術需要開發。因此，為了確保飲用水安全，準確檢測出水環境中、水處理系統內痕量沙拉沙星的方法是必備的前提。

????目前，國內外在萃取富集和定量檢測水中痕量沙拉沙星的技術上也不斷發展，常見的報道有固相萃取協同高效液相色譜串聯質譜的方法，在進行固相萃取之前，所有水樣品需要經過0.45?μm的濾膜過濾，溶解態的沙拉沙星經過固相萃取后，富集之后，檢測。這些方法局限在溶解態沙拉沙星的定量上。有研究報道，沙拉沙星屬于羧基酸物質，很容易吸附在顆粒物表面，因此，顆粒物表面的沙拉沙星很有必要萃取下來，進行定量，這樣，可以全方位的掌握水中沙拉沙星的污染現狀，為解析沙拉沙星在水環境中的遷移規律，在水處理系統中的衰減規律，都有重要的支撐作用。

發明內容

本發明的目的是提供一種水中懸浮顆粒物上痕量沙拉沙星萃取富集和定量的方法。

本發明的目的是通過以下將數據方案實現的：

（1）取目標水樣2000-4000ml，用微孔纖維膜過濾，收集過濾后的濾膜及表面截留的懸浮顆粒物，將濾膜晾干后剪成碎片置于三角瓶中，用量筒量取適量萃取劑倒入三角瓶中；用封口膜密封好后置于振蕩培養箱中，溫度設定為4-10℃，關閉光照使其黑暗，轉速設定為100-200次/min，振蕩8-12h后，將三角瓶取出，進行超聲波萃取，萃取時間20-35min，得到萃取液。

（2）用有機濾膜過濾步驟一得到的萃取液，同時將過濾后的萃取液轉移至K-D濃縮瓶中。

（3）加入脫水干燥劑到步驟二K-D濃縮瓶中的萃取過濾液，吸干水份后，將K-D濃縮瓶放入旋轉蒸發器進行濃縮，濃縮溫度30-45℃，時間為10-20min，濃縮后體積為1-2ml為宜。

（4）將步驟三濃縮后的液體，用氮氣吹掃至體積為1ml以下，停止氮氣吹掃。

（5）將步驟四得到的濃縮液萃取過濾液定容至1mL，將定容后的液體轉移到安捷倫專用瓶中。

（6）在步驟五得到的待測液中加入0.5ml的內標物，然后在超高壓液相色譜串聯三級質譜聯用儀器中檢測，檢測參數如下：

液相條件：a)流動相成分：A.0.2vol.%甲酸，B.甲醇；b)?進樣量：10μL；c)?流速：0.2?mL/min；d)?柱溫：30℃；e)?運行時間：8min；f)?色譜柱：Acquity?UPLC?BEH；g)?梯度：如表1所示。

質譜條件：a)?脫溶劑氣溫度：350℃；b)?源溫度：150℃；c）毛細管電壓：3000V；d)?脫溶劑氣流速：650L/h；e)?錐氣流速：50L/h。設置定性和定量離子見表2。

（7）?對色譜質譜分析圖進行分析，即完成檢測。

上述方法中，步驟（1）所述的微孔纖維膜的孔徑為0.45μm。

上述方法中，步驟（1）所述的懸浮顆粒物的質量與萃取劑的體積比為1g：15-20ml。

上述方法中，步驟（1）所述的萃取劑為甲醇。

上述方法中，步驟（1）所述的振蕩器為HDL公司的HZQ-F160型振蕩培養箱，轉速為100-200次/min；超聲波萃取機為KQ-100DE型超聲波萃取機，超聲頻率為23-40kHz。

上述方法中，步驟（2）所述的有機濾膜的孔徑為0.22μm。

上述方法中，步驟（3）所述的脫水干燥劑為無水硫酸鈉。

上述方法中，步驟（5）所述的定容有機溶劑為甲醇。

上述方法中，步驟（6）所述的內標物根據實際水體殘留情況選擇，本方法采用洛美沙星，結構和沙拉沙星類似，在目標水體未檢出的氟喹諾酮類物質。內標物不僅僅局限于這種，只要是同類物質，其結構相似，且在所檢測的水樣中沒有檢出均可。