[發明專利]一種通過TARC/CCL17評估特異性皮炎病情的診斷方法

無效

• 申請號: 201410412663.4
• 申請日: 2014-08-21
• 公開（公告）號: CN104181291A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 張偉;魏準;于波;竇俠;楊旸;章東生
• 申請（專利權）人: 深圳北京大學香港科技大學醫學中心
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明涉及分子生物學領域，具體涉及一種通過TARC/CCL17評估特異性皮炎病情的診斷方法。

背景技術

特應性皮炎是發病率很高的一類慢性皮膚病，對于特應性皮炎的診斷并不困難。要實現對特應性皮炎的有效治療，對其準確的診斷與病情評估至關重要達成廣泛共識的標準療法也已公布，只要選擇與標準相適應的診斷方法，即可毫無困難地做出判斷。

對于特應性皮炎的癥狀和嚴重程度，雖然引進了SCORAD評分法來評估皮膚表明癥狀與發展，基于此方法可以將嚴重性分為輕度、中度和重度。然而，由于評估方法過于復雜，SCORAD在臨床中并未廣泛應用。

TARC/CCL17的表達量與特異性皮炎的嚴重程度高度相關。研究表明外用皮質類固醇緩解了患特應性皮炎的NC/Nga小鼠皮膚的癥狀，同時抑制了TARC/CCL17在皮膚中的表達。同時臨床研究發現，外用皮質類固醇療法降低了特應性皮炎病人的血清TARC/CCL17值。另外，地塞米松，他克莫司和環孢素等藥物能抑制了由特應性皮炎病人外周血單核細胞TARC/CCL17的產生。TARC/CCL17過表達的轉基因小鼠，它們顯示出高血清TARC/CCL17值。通過給予小鼠各種刺激，可誘發特應性皮炎病變，這使我們可以確定包括TARC/CCL17在內的趨化因子物質起源與可提前作為臨床標志物的分子研究的關系。綜合上述研究結果證明，?TARC/CCL17可以作為臨床標志物用以評估特異性皮炎的病情。

發明內容

本發明的目的在于創造一種定量化的方法，使特異性皮炎癥狀嚴重程度的評估簡化，減輕醫生的負擔，同時提高檢測的準確度。

本發明上述目的通過以下技術方案予以實現：

通過Elisa抗體夾心法，檢測病人血清中，根據其TARC/CCL17蛋白的濃度判斷患者特異性皮炎病情的嚴重程度，進而給予適合的用藥。

與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：

本發明將特異性皮炎復雜繁瑣且主觀性較重的病情檢測方法轉化為一種定量化簡易客觀的檢測方法，減輕了醫生的負擔，亦增加了檢測的準確度。

附圖說明

圖1為TARC/CCL17標準曲線，橫坐標為TARC/CCL17蛋白含量，縱坐標為吸光度；

圖2為小樣本檢測后，各病例血清中的TARC/CCL17蛋白含量和SCORAD評分結果，其中橫坐標為SCORAD評分結果，縱坐標為TARC/CCL17蛋白含量。

具體實施方式

以下結合實施例來進一步解釋本發明，但實施例并不對本發明做任何形式的限定。

1.?將TARC/CCL17抗體包被固相載體。孵育一定時間，使形成固相抗體，洗滌除去未結合的抗體和雜質。

2.?加待檢標本，孵育，使標本中的抗原與固相載體上的抗體充分反應，形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。

3.?加酶標抗TARC/CCL17抗體，孵育，使形成固相抗體待測抗原酶標抗體夾心復合物。洗滌除去未結合酶標抗體。

4.?加底物顯色。固相上的酶催化底物產生有色產物,通過比色測標本中抗體的量。

5.?所獲得的標準品和樣品的發光值作為縱坐標，TARC/CCL17蛋白濃度作為橫坐標作標準曲線，每個樣品的濃度都可以從標準曲線上讀出。

標準曲線如下，取濃度為0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6ng/ml的TARC/CCL17標準品得標準曲線如圖1所示。

6.?特異性皮炎小樣本檢測如圖2所示，血清中TARC/CCL17在血清中的含量跟SCORAD評分結果高度一致。