[發明專利]片仔癀及其制劑在制備抗腫瘤轉移藥物中的應用

在審

• 申請號: 201410411675.5
• 申請日: 2014-08-20
• 公開（公告）號: CN104189037A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發明（設計）人: 潘杰;余伯陽;劉吉華;洪緋;羅志毅;袁慧君
• 申請（專利權）人: 漳州片仔癀藥業股份有限公司
• 主分類號: A61K36/258
• 分類號: A61K36/258;A61P35/04;A61K35/413;A61K35/55;A61K35/58
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 趙敏

技術領域

本發明屬于藥物制劑領域，具體涉及一種片仔癀及其制劑在制備抗腫瘤轉移藥物中的新用途。

背景技術

大多數腫瘤治療失敗的原因是因為均發生了不同程度和不同部位的腫瘤轉移，60％以上腫瘤患者于初次就診時已發現有腫瘤轉移，這個腫瘤的治療和治愈都造成了極大的困難。癌癥患者經手術治療、放化療等綜合治療，可有效遏制主要部位腫瘤的發展，但無法遏制惡性腫瘤易發生轉移的特性。腫瘤轉移的機制是極為復雜的，至今仍有許多問題尚不清楚，給腫瘤的防治均帶來極大困難。

中醫認為腫瘤的發病機制為“毒、瘀、虛”的動態變化過程，其中毒、瘀在疾病發展中占主導地位，是預防及治療腫瘤的關鍵。片仔癀是由牛黃、三七、蛇膽、麝香等多種名貴中藥精制而成的錠劑，氣微香，味苦、微甘，其清熱解毒、活血化瘀、消腫止痛、祛邪扶正的功效臻于上乘，充分體現了中醫治療腫瘤的優勢。

發明內容

為此，本發明所要解決的技術問題在于提供了片仔癀及其制劑的藥物新用途。

本發明公開了片仔癀及其制劑在制備抗腫瘤轉移藥物中的新用途。

所述腫瘤包括肺癌、肝癌、胃癌或宮頸癌腫瘤。

所述抗腫瘤轉移是指抑制腫瘤細胞與纖維連接蛋白的粘附。

所述抗腫瘤轉移是指抑制腫瘤細胞侵襲的能力。

所述抗腫瘤轉移是指抑制腫瘤血管的生成。

所述片仔癀選擇性加入常規輔料，按照常規工藝制成臨床上可接受的制劑。

所述制劑包括錠劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、丸劑、酊劑、酒劑、煎膏劑或合劑。

所述片仔癀及其制劑日服用制劑量含片仔癀0.6_-1.8g。

本發明所述方案的藥物新用途在現有片仔癀制劑的基礎上，開發出其與原有療效不同的新的治療用途，發現現有片仔癀可用于制備抗腫瘤轉移藥物中的新用途，尤其是抗肺癌、肝癌、胃癌、宮頸癌腫瘤的轉移功效。實驗證明片仔癀及其制劑可顯著的抑制肺癌、肝癌、胃癌、宮頸癌的腫瘤細胞與纖維連接蛋白的粘附、抑制腫瘤細胞侵襲的能力、抑制腫瘤血管的生成。不僅為現有片仔癀制劑的利用開發出新的用途，同時也為癌癥病機復雜、治療效果欠佳的疾病開辟了一種新的中藥治療方法，不僅有效率高且副作用低。

實驗例

(一)片仔癀對腫瘤細胞粘附能力影響的研究

1.目的與原理

通過研究片仔癀對腫瘤細胞粘附能力的影響，考察片仔癀的抗腫瘤轉移作用。細胞的粘附性在維持細胞外形、調節細胞分裂、運動的等功能中起十分重要的作用。腫瘤細胞通過表面受體粘附于基底膜及細胞外基質成分上。粘附是癌細胞侵襲的始動步驟。高侵襲的腫瘤細胞與基底膜成分的異質性粘附能力通常增高，而腫瘤細胞間的同質性粘附能力會下降。上述特性有利于腫瘤細胞與腫瘤母體分離，并侵犯基底膜等正常組織。通過檢測腫瘤細胞和細胞外基質蛋白(纖維粘連蛋白)的黏附率，檢測片仔癀抗腫瘤細胞黏附的能力，粘附率越低，說明片仔癀抗腫瘤粘附能力越強。

2主要試劑

人工重構基底膜材料Matrigel(主要成分為層粘蛋白和IV型膠原)、纖維連接蛋白(FN)、小牛血清白蛋白BSA、噻唑藍MTT。

3實驗步驟

(1)包被基底膜：用不含血清的空白培養基配制濃度為10μg/ml的FN，以50μl/孔分別加入96孔培養板，4℃過夜包被。

(2)水化基底膜：吸出培養板中的殘余液體，每孔加入50μl含10mg/ml?BSA的無血清培養基，37℃，30min。吸出殘余液體，用PBS洗兩遍。

(3)接種細胞：用胰酶消化腫瘤細胞，用不同濃度的藥液稀釋細胞，調整細胞密度為105個/ml,分別將100μl細胞懸液接種于培養板中，每個濃度設5個平行樣本。

(4)培養細胞：37℃，5％CO2條件下培養細胞3h。

(5)檢測：培養結束后，吸出培養板中的液體，加入PBS輕輕洗一遍，洗去未黏附的細胞，然后用MTT比色法測定，測定波長570nm，參比波長650nm，在酶聯免疫檢測儀上測定各孔光吸收值。

(6)實驗數據統計：黏附抑制率＝(1-給藥組A值/空白組A值)×100％。

4結果與討論

如表1所示，片仔癀在100～400μg/ml濃度范圍內，對肝癌SMMC-7721、肺癌A549、胃癌SGC-7901、宮頸癌Hela細胞與纖維連接蛋白的粘附有一定的抑制作用，且抑制作用與濃度成正比。統計結果與對照組具有顯著性差異，最高抑制率達65.78％。

表1片仔癀對各腫瘤細胞與纖維連接蛋白粘附的影響