[發明專利]一種蛹蟲草酵素粉及其制備方法有效
| 申請號: | 201410411396.9 | 申請日: | 2014-08-20 |
| 公開(公告)號: | CN104173389B | 公開(公告)日: | 2017-07-28 |
| 發明(設計)人: | 陳瑞琛;駱梅香;蔡玉鳳;黃欽耿;翁雪清;黃建忠;施巧琴;吳松剛 | 申請(專利權)人: | 廈門元尊生物工程有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/14 | 分類號: | C12N1/14;A61K36/068;A23L33/00;A23L31/00;A61P37/08;A61P35/00;A61P37/02;A61P11/00;A61P1/16;A61P13/12 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司11245 | 代理人: | 關暢,陳曉慶 |
| 地址: | 361022 福建省廈門市海滄區新陽街道*** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 蟲草 酵素 及其 制備 方法 | ||
1.一種制備蛹蟲草酵素粉的方法,包括如下步驟:
(1)將活化的蛹蟲草菌株接種于種子培養基,26-28℃振蕩培養,得到蛹蟲草一級種子液;
所述種子培養基由溶劑和溶質組成,溶劑為水,溶質為葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和消泡劑;所述葡萄糖在所述種子培養基中的濃度為6-8g/100ml,所述酵母粉在所述種子培養基中的濃度為4-6g/100ml,所述蛋白胨在所述種子培養基中的濃度為5-7 g/100ml,所述磷酸二氫鉀在所述種子培養基中的濃度為0.2-0.4 g/100ml,所述硫酸鎂在所述種子培養基中的濃度為0.02-0.04 g/100ml,所述消泡劑在所述種子培養基中的濃度為0.1-0.2 g/100ml;
所述步驟(1)中,所述活化的蛹蟲草菌株是將蛹蟲草菌株轉接到斜面培養基上,26-28℃培養得到;
所述蛹蟲草菌株購自廣東省微生物菌種保藏中心,保藏號為GIM5.269;
所述步驟(1)中,所述振蕩培養的天數為3天,所述振蕩培養的轉速為250rpm;
(2)將蛹蟲草一級種子液接入二級種子培養基,26-28℃振蕩培養,得到蛹蟲草二級種子液;
所述二級種子培養基由溶劑和溶質組成,溶劑為水,溶質為葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和消泡劑;所述葡萄糖在所述二級種子培養基中的濃度為4-6 g/100ml,所述酵母粉在所述二級種子培養基中的濃度為4-8 g/100ml,所述蛋白胨在所述二級種子培養基中的濃度為4-8 g/100ml,所述磷酸二氫鉀在所述二級種子培養基中的濃度為0.2-0.4 g/100ml,所述硫酸鎂在所述二級種子培養基中的濃度為0.02-0.04 g/100ml,所述消泡劑在所述二級種子培養基中的濃度為0.1-0.2 g/100ml;
所述步驟(2)中,所述接種量為1%或2%;所述培養的天數為3天;所述通氣量為1:0.4 vvm、1:0.6 vvm或1:0.8 vvm;攪拌轉速為400-500rpm ;
(3)根據放大工藝的需要,按步驟(2)的方法由上一級種子液制備得到下一級種子液;
(4)將最終得到的種子液接入發酵培養基中,26-28℃振蕩培養,得到蛹蟲草發酵液;
所述發酵培養基由溶劑和溶質組成,溶劑為水,溶質為葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和消泡劑;所述葡萄糖在所述發酵培養基中的濃度為3-6 g/100ml,所述酵母粉在所述發酵培養基中的濃度為4-6 g/100ml,所述蛋白胨在所述發酵培養基中的濃度為4-6 g/100ml,所述磷酸二氫鉀在所述發酵培養基中的濃度為0.2-0.4 g/100ml,所述硫酸鎂在所述發酵培養基中的濃度為0.02-0.04 g/100ml,所述消泡劑在所述發酵培養基中的濃度為0.1-0.2 g/100ml;
所述步驟(4)中,所述發酵培養基的體積為75L、150L、750L或3850L;所述接種量為3%、4%或5%;所述培養的天數為4天;所述通氣量為1:0.3 vvm、1:0.4 vvm、1: 0.5vvm;所述攪拌轉速為400rpm;
(5)將蛹蟲草發酵液離心收集菌體、干燥和粉碎過篩,即得蛹蟲草酵素粉;
所述干燥為遠紅外干燥;
所述篩為120目篩。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述步驟(3)中,所述下一級種子液為蛹蟲草三級種子液和/或四級種子液。
3.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述步驟(1)中,所述活化的蛹蟲草菌株在將蛹蟲草菌株轉接到斜面培養基上之前還包括如下步驟:將所述保藏號為GIM5.269的蛹蟲草菌株在26℃在斜面培養基上見光培養7天,再經15℃避光培養5天,挑選呈現金黃色的單菌落。
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