[發明專利]用于鑒定軍團菌毒力的方法及其專用試劑盒

有效

• 申請號: 201410409558.5
• 申請日: 2014-08-19
• 公開（公告）號: CN104165879A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 劉文軍;李晶;秦天;任紅宇;賈瀟瀟;周海健;邵祝軍;楊利敏
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所;中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;何葉喧

技術領域

本發明涉及一種用于鑒定軍團菌毒力的方法及其專用試劑盒。

背景技術

軍團菌，系需氧革蘭氏陰性桿菌，以嗜肺軍團菌最易致病。軍團菌屬已有48個軍團菌種被發現，其中19種被認為與人類呼吸道感染有關。

流行病學調查證實，軍團菌是通過氣溶膠經空氣傳播給人的，與冷卻塔、熱水供應系統、蒸汽濃縮器、礦泉療養浴池、臨床呼吸裝置的加濕器、超級市場蔬菜噴霧器、噴泉等有關。個別報道，引用被軍團菌污染的水和接觸被軍團菌污染的土壤也能引起軍團病。目前為止，人與人之間的傳播尚未得到證實。軍團病的特征為肺炎伴全身性毒血癥癥狀，嚴重者出現周圍回圈衰竭、呼吸衰竭。胸部X線表現在早期為單葉斑片狀陰影，繼而肺實變，病變迅速發展至多肺葉段，可有肺膿腫形成或少量胸腔積液征。確診依賴于特異性抗體的檢查及在痰、胸腔積液、肺組織活檢標本中分離出細菌。

發明內容

本發明的目的是提供一種用于鑒定軍團菌毒力的方法及其專用試劑盒。

本發明提供了一種鑒定待測軍團菌的毒力的試劑盒，包括拉曼光譜儀和記載有如下操作規程的載體：

(1)設置拉曼光譜儀的如下參數：

關鍵參數為：Spectral?acquisition?setup；

在Range界面設置如下參數:

Grating?scan?type:Extended；

Confocality:Standard；

Spectrum?Range:Low?100.00；

Centre?Raman?shit/cm^-1；

High?2000.00；

Configuration:Laser?name?532nm?edge；

Grating?name?1800?l/mm；

在Acquisition界面設置如下參數：

Exposure?time/s:10.00；

Accumulations:1；

Objective:50；

Laser?power％:100；

(2)取待測軍團菌置于載玻片上，放置到完成步驟(1)的參數設置的拉曼光譜儀中進行檢測；

(3)完成步驟(2)后，將拉曼光譜儀的自帶軟件設置為WiRE3.0，進行數據處理，得到拉曼光譜圖；拉曼光譜圖中，在500-2000橫坐標范圍內：如果存在1個以上(含1個)縱坐標(counts)強度為4000以上的峰，該待測軍團菌為軍團菌強毒株；如果不滿足上述條件，該待測軍團菌為軍團菌弱毒株。

本發明還保護一種鑒定待測軍團菌的毒力的方法，包括如下步驟：

(1)設置拉曼光譜儀的如下參數：

關鍵參數為：Spectral?acquisition?setup；

在Range界面設置如下參數:

Grating?scan?type:Extended；

Confocality:Standard；

Spectrum?Range:Low?100.00；

Centre?Raman?shit/cm^-1；

High?2000.00；

Configuration:Laser?name?532nm?edge；

Grating?name?1800?l/mm；

在Acquisition界面設置如下參數：

Exposure?time/s:10.00；

Accumulations:1；

Objective:50；

Laser?power％:100；

(2)取待測軍團菌置于載玻片上，放置到完成步驟(1)的參數設置的拉曼光譜儀中進行檢測；

(3)完成步驟(2)后，將拉曼光譜儀的自帶軟件設置為WiRE3.0，進行數據處理，得到拉曼光譜圖；拉曼光譜圖中，在500-2000橫坐標范圍內：如果存在1個以上(含1個)縱坐標(counts)強度為4000以上的峰，該待測軍團菌為軍團菌強毒株；如果不滿足上述條件，該待測軍團菌為軍團菌弱毒株。

所述拉曼光譜儀具體可為生產廠家為英國雷尼紹公司(RENISHAW)，型號為inVia?Raman?Microscope的拉曼光譜儀。