[發明專利]一種長孢洛德酵母及其應用

有效

• 申請號: 201410409466.7
• 申請日: 2014-08-19
• 公開（公告）號: CN104164372A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 段焰青;馮斌;楊培香;者為;夏建軍;朱保昆;黨立志;王文元
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;A24B15/20;C12R1/645
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙) 53108
• 代理人: 謝嘉;旃習涵

技術領域

本發明屬于應用微生物技術領域，更具體說，本發明涉及一種能提高烤煙品質的長孢洛德酵母。同時，本發明還涉及所述的長孢洛德酵母在煙草生產中的用途。

背景技術

煙草是我國財政的重要支柱之一。近二十年來，每年煙草稅收占國家財政收入的10％左右，對我國的社會和經濟發展作出了巨大貢獻。要推進我國煙草進程，實現卷煙工業可持續發展，就必須走煙草科技創新之路。國家煙草專賣局在“十一五”中國卷煙科技發展綱要第7條明確指出,要“攻克影響煙葉香氣質、香氣量的關鍵技術”，縮小與國外煙葉質量差距,以提高國內外市場競爭力。

煙葉發酵是煙草加工過程中的主要工藝環節。改進煙葉發酵技術，增進煙葉的香吃味質量，已成為卷煙工業提高加工工藝技術水平的重要手段。特別是在醇化發酵過程中,煙葉主要化學成分會發生相應的變化,青雜氣和刺激性逐漸降低,香氣顯露,吃味醇和,色澤均勻并加深，故而煙葉醇化在卷煙工業中對煙葉質量的改變起著非常重要的作用。

研究表明，煙草中存在大量的微生物群落,包括細菌、放線菌、真菌和酵母等,其中以細菌為主，且芽孢桿菌屬是優勢菌屬。煙葉中的微生物種類、數量不僅因不同煙草品種和不同時期而有所不同，而且與醇化條件和醇化效果密切相關。微生物的作用貫穿煙草發酵、醇化的始終，對改善煙葉品質起著重要的作用。

國內外煙草工作者在煙草微生物分離和利用微生物發酵改善煙草品質、改進煙葉發酵進程、縮短煙葉發酵周期等方面做了很多工作,特別是通過施加選育的微生物及制劑于煙草中,通過微生物的代謝活動降低煙堿等有害成分,增加煙草香吃味,提高煙草質量等。

目前，關于添加微生物提高煙葉品質的研究已有報道。但經文獻檢索，尚未發現與本發明內容相同文獻的公開報道。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，從煙葉表面篩選具有工業化生產前景的菌株，提供一種能提高烤煙品質的長孢洛德酵母。

本發明的目的還在于提供一種所述長孢洛德酵母在煙草生產中的應用，即提供一種能有效提高烤煙品質的方法。

本發明的目的通過下述技術方案予以實現。

*除非另有說明，本發明中所采用的百分數均為質量百分數。

A.本發明從烤煙新鮮煙葉中分離了一株優勢微生物OF-08作為試驗菌種，對其進行了26S?rDNA分析，鑒定結果表明該細菌屬于長孢洛德酵母，其分類命名為Lodderomyces?elongisporus.OF-08，保藏號為CGMCCNo.6645。

本發明所述的長孢洛德酵母OF-08(L.elongisporus?OF-08)菌株的形態學特征為：菌落較大，呈卵球形，奶白色凸起，菌落比較粗糙，邊緣整齊；在液體培養基中，培養液澄清有沉淀，且有菌蹼。

本發明所述的長孢洛德酵母OF-08的分子鑒定特征為：利用通用引物NL-1(5'CATATCAATAAGCGGAGGAAAAG?3')和NL-4(5'GGTCCGTGTTTCAAGACGG3')，以長孢洛德酵母OF-08的基因組DNA作為模板擴增得到600?bp左右的PCR產物，回收測序、校正之后得到的OF-08菌株的部分26S?rDNA基因序列578bp,該序列已經提交國際核苷酸序列數據庫(GenBank)，序列索引號為：JQ916053。

本發明提供了一種長孢洛德酵母制劑，該制劑按常規方法制備，即將長孢洛德酵母OF-08(L.elongisporus?OF-08)擴大發酵培養后制成菌劑。

B.本發明還提供了一種所述長孢洛德酵母在煙草生產中的應用，即所述長孢洛德酵母提高烤煙品質的方法。其具體作法如下：

稱取預先平衡水分至13％的煙絲，噴施長孢洛德酵母OF-08(L.elongisporus?OF-08)菌劑，以煙絲重量計，每100克煙絲噴施菌劑量為15～30mL，然后將處理后的煙絲放入22℃，60％的恒溫恒濕箱內發酵24h，即可。

與現有技術相比，本發明具有以下突出的優點：

1.試驗數據表明，所述的長孢洛德酵母能有效提高烤煙品質和增加煙葉香氣。本發明成功地將生物技術引入煙草生產中，是煙草生產技術的一個重要突破；

2.通過改善煙葉品質，大大提高煙葉可用性。加速煙葉發酵，提高煙葉等級質量。使煙葉可溶性還原糖含量增加；而蛋白質、纖維素、總氮、煙堿含量下降。因而糖氮比、糖堿比和氮堿比的比值趨于上升,使化學品質更為協調，煙葉評吸品質得到明顯提升。

3.工藝簡單，操作容易，成本低，適于推廣應用，對促進卷煙工業健康發展具有積極意義。