[發明專利]一種微生物溶藻制劑同步脫氮、脫有機物的方法

在審

• 申請號: 201410407989.8
• 申請日: 2014-08-19
• 公開（公告）號: CN105314739A
• 公開（公告）日: 2016-02-10
• 發明（設計）人: 程凱;劉君艷;趙以軍;田小方;李祝
• 申請（專利權）人: 湖北工業大學
• 主分類號: C02F3/34
• 分類號: C02F3/34;C02F101/38;C02F101/30
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 常海濤

技術領域

本發明涉及微生物溶藻技術，具體涉及一種微生物溶藻制劑同步脫氮、脫有機物的方法。

背景技術

微生物溶藻技術代表了未來溶藻技術的發展方向。但由于微生物發酵的培養基富含氮、有機物營養物質，如果直接向水體中投加，勢必會大幅度增加水體的營養物質含量，甚至可能加重富營養化。因此，采用發酵法生產的微生物溶藻制劑必須有效去除這些營養物質后才能在自然水體中使用，同時還要滿足去除營養物質的工藝措施對溶藻效果不會帶來影響。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種微生物溶藻制劑同步脫氮、脫有機物的方法。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種微生物溶藻制劑同步脫氮、脫有機物的方法，包括如下步驟：

(1)將溶藻微生物進行發酵培養，離心收集發酵液。

(2)去除發酵液中的水分。

(3)用有機溶劑萃取去除水分的發酵產物，用超純水溶解萃取物。

(4)將超純水溶解的萃取物加到硅膠柱中，用有機溶劑收集餾分，將收集的餾分干燥后再用超純水溶解。

步驟(1)中所述的溶藻微生物優選為赤潮異彎藻溶藻細菌假單胞菌F5-2(赤潮異彎藻溶藻細菌假單胞菌F5-2已在文獻“徐玲玲，一株赤潮異彎藻溶藻細菌的分離與溶藻特性研究，華中師范大學碩士學位論文2010”中公開)，F5-2發酵培養的條件優選為：在30℃恒溫，170rpm轉速，接種比5％的條件下于牛肉膏蛋白胨液體培養基中振蕩培養24h；牛肉膏蛋白胨液體培養基配方為：蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g，加單蒸水至1L。

步驟(2)去除發酵液中的水分的方法只要不影響發酵產物溶藻活性即可，如冷凍干燥、噴霧干燥、減壓蒸發等。

步驟(3)中的有機溶劑為能夠萃取出溶藻活性物質的極性小的有機溶劑，如乙醇、甲醇、丙酮、氯仿、石油醚等。

步驟(4)中所述的硅膠柱優選為通過濕法裝柱得到；所述的硅膠的粒度優選為200～300目。

步驟(4)中所述的有機溶劑優選為無水乙醇。

更優選的，一種微生物溶藻制劑同步脫氮、脫有機物的方法，包括如下步驟：

(1)將溶藻微生物進行發酵培養，離心收集發酵液。

(2)將發酵液冷凍干燥得到干粉。

(3)往干粉中加入無水乙醇，充分攪拌，離心收集上清液；重復數次，合并上清液旋干后用超純水溶解。

(4)將(3)中超純水溶解的溶液加到硅膠柱中，用無水乙醇收集餾分，將收集的餾分旋蒸蒸干后再用超純水溶解。

步驟(3)中所述的干粉與無水乙醇的質量體積比優選為1:10(g/mL)；所述的旋干優選為于40℃旋干；所述的干粉與超純水的質量體積比優選為2:1(g/mL)。

步驟(4)優選為：取200～300目硅膠，加入適量無水乙醇，攪拌排氣泡；先在柱內加適量乙醇，然后將硅膠乙醇混合物加入柱內，待沉降完全后加(3)中超純水溶解的溶液，以無水乙醇做為流動相進行洗脫，將收集的餾分旋蒸蒸干再用超純水溶解。

本發明相對于現有技術具有如下優點和效果：發酵得到的溶藻微生物發酵液由于其主要成分為微生物發酵培養基，因此氮、有機物含量極高，直接向水體中投加將增加水中的營養物濃度，從而加重水體富營養化，本發明可以有效去除溶藻微生物發酵液中的氮和有機物(去除率超過98％)，同時對溶藻活性無負面影響。

附圖說明

圖1是實施例1發酵液的溶藻效果圖。

圖2是實施例2干粉的溶藻效果圖。

圖3是實施例3固相萃取后樣液的溶藻效果圖。

圖4是實施例4餾分的溶藻效果圖。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細的描述。應理解，下面的實施例僅用于說明本發明而不用于限制本本發明的范圍。

下述實施例中所用到的菌種及藻種：