[發(fā)明專利]一種利用拉曼光譜技術聯(lián)合染色快速鑒別周圍神經(jīng)性質的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410405809.2
• 申請日: 2014-08-18
• 公開（公告）號: CN104142322A
• 公開（公告）日: 2014-11-12
• 發(fā)明（設計）人: 陳增淦;徐沁同
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬中山醫(yī)院
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 金重慶

1.一種利用拉曼光譜技術聯(lián)合染色快速鑒別周圍神經(jīng)性質的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟：獲取周圍神經(jīng)的斷面標本，厚度為1-2mm；進行冰凍切片，切片厚度為20-30μm；在顯微拉曼光譜儀下，將激光束聚焦于神經(jīng)纖維斷面進行拉曼光譜采集；Karnovsky-Roots染色30min；再次在顯微拉曼光譜儀下，用同樣波長的激光束聚焦于神經(jīng)纖維斷面進行拉曼光譜采集；根據(jù)染色前后的光譜結果判斷神經(jīng)纖維的性質。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的顯微拉曼光譜儀為HORIBA?Jobin?Yvon?LabRam-1B型激光共聚焦顯微拉曼光譜儀。

3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的顯微拉曼光譜儀為HORIBA?Jobin?Yvon?XploRA-FDU型激光共聚焦顯微拉曼光譜儀。

4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的激光束波長為632.8nm。

5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的激光束波長為532nm。

6.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的拉曼光譜采集范圍為1400-2200cm^-1，采集時間為50s。

7.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的拉曼光譜采集范圍為1400-2200cm^-1，采集時間為10s。

8.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的判斷神經(jīng)纖維性質的方法為：對采集得到的拉曼光譜數(shù)據(jù)使用LabSpec軟件進行人工基線處理和計算機多項式迭代法平滑曲線，獲得最終用于數(shù)據(jù)分析的顯微拉曼光譜，染色30min后I₂₁₀₀/I₁₄₄₀比值>0.2的神經(jīng)纖維是運動神經(jīng)纖維，反之則是感覺纖維。

9.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的判斷神經(jīng)纖維性質的方法為：對采集得到的拉曼光譜數(shù)據(jù)使用LabSpec軟件進行人工基線處理和計算機多項式迭代法平滑曲線，獲得最終用于數(shù)據(jù)分析的顯微拉曼光譜，經(jīng)過Karnovsky-Roots染色30min后，拉曼光譜在2100cm^-1-2160cm^-1出現(xiàn)明顯的拉曼強度是運動神經(jīng)纖維，反之則是感覺神經(jīng)纖維。