[發明專利]一種提高含蝦青素轉基因番茄產量和轉基因番茄中蝦青素含量的方法有效
| 申請號： | 201410403342.8 | 申請日： | 2014-08-15 |
| 公開（公告）號： | CN104206139A | 公開（公告）日： | 2014-12-17 |
| 發明（設計）人： | 王華;楊婷;嚴寧;胡虹;黃俊潮 | 申請（專利權）人： | 中國科學院昆明植物研究所 |
| 主分類號： | A01G1/00 | 分類號： | A01G1/00;A01G7/06 |
| 代理公司： | 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙) 53108 | 代理人： | 馬曉青 |
| 地址： | 650201 *** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 提高 含蝦青素 轉基因 番茄 產量 中蝦青素 含量 方法 | ||
1.一種提高含蝦青素轉基因番茄產量和轉基因番茄中蝦青素含量的方法，包括播種、施肥、遮陰、標記、果實采后處理、凍干、含量測定步驟，其特征在于使轉基因番茄在全光照下生長，并在花期噴施0.02％的番茄靈溶液。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于首先將轉基因番茄種子播種，2個月后將小苗移栽在地里，按下表對番茄進行噴施番茄靈、遮陰處理；
然后，隨機選取每個處理的20-50株番茄，打上標記，待番茄進入結果期，對已標記的每株番茄上的每個果實也打上標記，以便得到每株總產量，最后由每個處理的20-50株的總量來計算平均單株產量，并以分批采摘不同處理的成熟果實作為比較蝦青素含量的材料；
果實采后處理：每次摘取不同處理的成熟果實各3-5個，重復3次，將果實清洗、去蒂，放入溫度為-20℃的冰柜中冷凍48小時以上，果實凍實后，將果取出在避光的條件下自然化凍，在這一低溫冷凍過程中，細胞液會因為膨脹而突破細胞壁，在化凍過程中自然流出，脫去鮮果65-70％的水分，然后用攪拌機破碎果肉，并使用離心機離心，脫去物料60-65％的水分；
凍干：使用冷凍凍干機對上述已脫水處理的物料進行冷凍干燥，凍干設置為：預凍至-25℃以下，抽真空，開加熱，當真空達0.03MPa時，設定為0℃，12小時后可漸進的調到30℃；
蝦青素含量測定：將冷凍干燥好的樣品粉碎、裝袋、密封，進行蝦青素含量測定，測定采用高效液相色譜法分離，其液相條件：色譜柱為WatersSpherisorb?OSD2(5μm,4.6,250mm)，液相型號為Waters(Milford,MA,USA)，進樣量為20μl；流動相A相為乙腈/甲醇/Tris-HCL(pH?8.0)，體積比為84:2:14，B相為甲醇/乙酸乙酯，體積比為68:32；以1.2mL/min的流速線性梯度洗脫色素，從100％A相到100％的B相，每個梯度用時15分鐘，隨后用B相洗脫10分鐘，通過比對各顏色組分和標準品的光譜吸收和相對保留時間來鑒定各組分，通過將峰面積的積分值與標準品對比將其轉化為濃度值從而對各組分進行定量，標準品購買自sigma公司和Wako公司。
3.根據權利要求1所述的栽培方法，其特征在于所述轉基因番茄是保藏號為CGMCC?No?9223號的轉基因番茄。
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