[發明專利]一種可用于篩選生豬腸道高粘附能力微生態制劑的方法

在審

• 申請號: 201410403216.2
• 申請日: 2014-08-15
• 公開（公告）號: CN104164396A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 陳廷濤;王鑫;辛洪波
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/25;C12R1/225;C12R1/01
• 代理公司: 南昌市平凡知識產權代理事務所 36122
• 代理人: 夏材祥

1.一種可用于篩選生豬腸道高粘附能力微生態制劑的方法，其特征是:

（1）樣品的收集和保存：收集健康豬盲腸中的糞便和腸壁粘膜層物質，轉人厭氧環境，加入甘油，其重量為糞便和甘油總重量的10％，旋渦振蕩器混勻，-8O?℃保存；

（2）恒化器的組裝和使用：將儲料罐，發酵罐，廢液罐，橡膠塞，硅膠管，裝NaOH的玻璃瓶及通氣過濾器按順序連接起來，置于工作臺上，連接混合氣體，蠕動泵，pH調節器，磁力攪拌器，廢氣排除裝置；

（3）恒化器內培養基的制備：按加入成分占終產物質量百分比加入如下成分：5‰可溶性淀粉，3‰牛乳酪蛋白，3‰蛋白胨，0.6‰果膠，0.6‰木聚糖，0.6‰阿拉伯半乳聚糖，0.6‰支鏈淀粉，0.4‰半胱氨酸,?0.01‰血紅素，0.25‰膽固醇，0.25‰鵝脫氧膽酸，0.25‰膽酸，2‰磷酸二氫鉀，10‰磷酸氫二鉀，4.5‰氯化鈉，0.5‰七水硫酸鎂，0.45‰二水氯化鈣，培養基經高壓滅菌后用蠕動泵泵入儲料罐內；

（4）待恒化器穩定后，在培養基中接種步驟（1）中得到的-8O?℃保存的豬糞便樣品或腸粘膜層，其重量為培養基和豬糞便或培養基和腸粘膜層總重量的10%，連續培養8-16天后得到的的培養物即為健康人體腸道微生態系統；

（5）刮取恒化器瓶壁上的物質，利用活菌技術方法分離微生物并鑒定；鑒定出的微生物利用細胞粘附試驗和益生菌評價指標評價其益生效果。