[發明專利]一種穩定的α-淀粉酶檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201410401270.3
• 申請日: 2014-08-14
• 公開（公告）號: CN104198691A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發明（設計）人: 李偉奇;李杰;房君江;張秀文;林清玉
• 申請（專利權）人: 上海睿康生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/52
• 分類號: G01N33/52
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 郭國中

技術領域

本發明涉及醫學免疫體外診斷領域，具體地，涉及一種穩定的α-淀粉酶檢測試劑盒。

背景技術

淀粉酶(α-Amylase)簡稱AMS或AMY，一類能將淀粉分子水解的酶，一般作用于可溶性淀粉、直鏈淀粉、糖元等α-1，4-葡聚糖，水解α-1，4-糖苷鍵，產生葡聚糖、麥芽糖和葡萄糖分子。淀粉酶在胰腺和唾液腺中含量豐富，胰淀粉酶由胰腺以活性狀態排入消化道，是最重要的水解碳水化合物的酶，和唾液腺分泌的淀粉酶一樣都屬于α-淀粉酶。淀粉酶分子量小，可通過腎小球濾過，隨尿排出。當罹患胰腺疾病或有胰腺外分泌功能障礙時可引起淀粉酶活性升高或降低，因此，測定血清和尿液中的淀粉酶對胰腺炎的診斷具有重要意義。尿淀粉酶水平波動較大，所以優選血清淀粉酶檢測，或兩者同時測定。

α-淀粉酶是最早應用于臨床檢驗的一個酶，早在20世紀初，就用來診斷急性胰腺炎，但是血清和尿液中的α-淀粉酶測定，長期以來一直是最難標準化的分析法。

其診斷方法：血、尿α-淀粉酶(AMY)測定在臨床上的應用已有很長的歷史，到目前為止，測定方法已不下200種。應用于淀粉酶測定的底物種類繁多，早期的測定方法所采用的底物是淀粉，六十年代出現了以染色淀粉為底物的測定方法，由于淀粉結構組成的不確定性及酶解產物的不均一性，使酶促反應不能按化學式量進行計算。應用不同來源、廠家、批號的淀粉作底物時，測得結果差別較大，方法不易標準化。染色淀粉中色素的加入量不易控制，操作繁雜，不適合自動分析。七十年代后期，國外出現了以具有明確結構組成的人工合成底物進行α-淀粉酶測定的方法，這些方法成為現在檢測α-淀粉酶的主流，但是各個方法也存在著一些弊端，IFCC批準了用亞乙基封閉的G7-PNP作底物的酶偶聯法(EPS法)作為臨時推薦方法。

發明內容

針對現有技術中的缺陷，本發明的目的是提供一種穩定的α-淀粉酶檢測試劑盒，本發明采用IFCC批準的對于α-淀粉酶檢測的參考方法，將其制備成適用于全自動生化儀的試劑盒，使得操作更為簡便，同時通過加入十二烷基苯磺酸鈉改善了試劑盒的性能。采用此方法重復性好，試劑穩定，靈敏度高，線性范圍廣。

本發明是通過以下技術方案實現的：

本發明涉及一種穩定的α-淀粉酶檢測試劑盒，包括試劑R1及試劑R2，所述試劑R1的各組分及濃度包括：

所述試劑R2的各組分及濃度包括：

優選地，所述試劑R1中的緩沖液的pH?7.0～8.0。

優選地，所述試劑R1中的緩沖液包括甘氨酸緩沖液、Tris緩沖液、甘氨酸-NaOH緩沖液、HEPES緩沖液中的一種或幾種的混合。

優選地，所述試劑R1中的穩定劑包括牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖或螯合劑EDTA中的一種。

優選地，所述試劑R1中的防腐劑為疊氮鈉或proclin300防腐劑。

優選地，所述試劑R2中的緩沖液的pH?7.0～8.0

優選地，所述試劑R2中的緩沖液包括甘氨酸緩沖液、Tris緩沖液、甘氨酸-NaOH緩沖液、HEPES緩沖液中的一種或幾種的混合。

優選地，所述試劑R2中的穩定劑包括牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、螯合劑EDTA中的一種或幾種。

優選地，所述試劑R2中的防腐劑為疊氮鈉或proclin300防腐劑。

與現有技術相比，本發明具有如下的有益效果：

1、本發明不需要復雜的預處理及特殊儀器，試劑具有足夠的穩定性及易于操作等優點；

2、本發明對IFCC批準的對于α-淀粉酶檢測的參考方法進行一定的改善，以達到操作簡便、靈敏度高、特異性好，快速、測定結果準確可靠的目的；

3、本發明試劑中加入十二烷基苯磺酸鈉，提高了底物與α-淀粉酶的反應能力，同時也加快了由α-淀粉酶輔助的水解反應，可以減少底物與酶的用量，減少了試劑的成本，同時十二烷基苯磺酸鈉可阻止底物的非特異性水解，進而使得底物的穩定性顯著提高，大大加強了試劑的穩定性和重復性。

附圖說明

通過閱讀參照以下附圖對非限制性實施例所作的詳細描述，本發明的其它特征、目的和優點將會變得更明顯：

圖1為根據朗道標準品，定標AMY試劑的定標曲線圖，其中X軸表示AMY的含量，Y軸表示吸光度。