[發明專利]一種忘萱草鱗莖芽的組培方法

有效

• 申請號: 201410399992.X
• 申請日: 2014-08-14
• 公開（公告）號: CN104285786A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 盧寶偉;安鳳霞;李偉;孟雪;孟慶敏;鄭寶仁;徐國柱;王洪軍
• 申請（專利權）人: 黑龍江生態工程職業學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種宿根花卉忘萱草組織培養技術，具體涉及一種忘萱草‘紅寶石’鱗莖芽的組培方法。?

背景技術

黑龍江地理氣候條件使黑龍江省園林綠化苗木種類單一，抗寒、抗逆品種缺乏，特別是能夠應用于綠化的花卉品種少之又少，據哈爾濱園林處統計，園林綠化花卉在2013年的一年缺口量達一億株左右，尤其是宿根花卉，各大苗圃幾乎沒有現苗，而萱草屬于多年生宿根花卉，具有抗寒越冬能力，在城市極端逆境環境中能夠正常生長。?

萱草不能用種子進行大量生產繁殖，只有靠分株繁殖，而一年只能分4～5株，分株繁殖生產技術是嚴重制約萱草生產的瓶頸，目前市場上供應只有黃花萱草，而忘萱草在花色、株型、抗寒性等方面均優于黃花萱草，因此對忘萱草簡約化快繁技術進行研究具有廣闊的市場前景；忘萱草(Hemerocallis?fulva(L.)L.Var.disticha(Donn.)Baker)，為百合科多年生草本宿根花卉，葉狹長，花呈喇叭形，花莖短而適中，花色為深紅，色彩華麗，具有觀賞價值高、適應性強、栽培管理粗放等特點，能廣泛用于城市綠化和園林景觀建設。?

對忘萱草‘紅寶石’這個品種的研究報道較少，目前還尚未有對忘萱草‘紅寶石’鱗莖芽組培方法的報道，本組培快繁中心多年對忘萱草‘紅寶石’快繁技術進行研究，盧寶偉等對忘萱草‘紅寶石’花托為外植體進行組培快繁試驗中，獲得快繁組培苗；在安鳳霞、盧寶偉等的研究中用紅花萱草的地下塊莖作為外植體獲得組培試驗苗；與目前組培技術相比，更需要開發出具有周期短，能大量快速繁殖的忘萱草‘紅寶石’組培方法，來滿足日趨增大的市場需求。?

發明內容

本發明的目的：提供一種忘萱草‘紅寶石’的鱗莖芽組培快繁方法，該培養方法具有培養程序少、增殖系數高、周期短等諸多優點。?

本發明的技術方案：是一種忘萱草‘紅寶石’鱗莖芽快速組培成苗的方法，其特征在于按照以下步驟進行：?

①外植體選擇和處理：依據忘萱草‘紅寶石’每年春季3-4月份具有分株繁殖特性，外植體選取鱗莖盤兩側具有分生能力的鱗莖芽，首先將鱗莖盤切割成0.4立方厘米帶有鱗莖芽的外植體小塊放入三角瓶中流水沖洗2-3小時，沖洗干凈后用質量百分比濃度為70％酒精浸泡30秒進行殺菌，再用質量百分比濃度為0.2％的升汞溶液浸泡消毒18分鐘，最后用無菌水震蕩清洗5次。?

②叢生芽誘導和增殖：將無菌的帶有鱗莖芽外植體小塊放入叢生芽增殖誘導培養基中3-4天后會直接分化成芽，隨著芽的生長會在芽基部分化出新的側芽，每個鱗莖芽基芽8-12天后能分化出7-10個叢生側芽，叢生芽誘導增殖培養基是MS+土豆泥20mg/L+6-芐基嘌呤1.5mg/L+激動素1.0mg/L。?

③叢生苗生根誘導：當叢生苗長到3-4厘米左右的時放入生根培養基中培養，生根培養基是1/4MS+土豆泥5mg/L+萘乙酸0.3mg/L，當誘導根3-4條時再進行煉苗，根生長極為健壯，組培苗長勢極好，本過程組培苗移栽成活率達98％以上。?

上述叢生芽誘導增殖和叢生苗生根誘導的基礎培養液為MS(Murashige?and?Skoog)?

上述培養基均添加3％(質量百分比)蔗糖和0.6％(質量百分比)卡拉膠，pH值5.8。將分裝好的培養基置于高壓蒸汽滅菌鍋中在110℃滅菌20min，取出冷卻，放置2-3d即可使用。?

本發明獲得的有益效果：?

與現有的忘萱草‘紅寶石’其他組培方法相比，本發明創新點是所采用的外植體鱗莖芽，鱗莖芽是鱗莖盤兩側具有分生能力的芽點，其優點在于不僅誘導啟動時間短，一般3-4天即可直接誘導啟動出芽，誘導率達100％，而且增殖誘導率高，每個鱗莖芽基芽8-12天后能分化出7-10個叢生側芽；本人曾用過花托作為外植體進行組織培養，但花托外植體誘導啟動時間較長，需要15-20天，且誘導啟動和增殖要分開進行，而該方法將誘導和增殖分化結合成一步進行，不僅節省誘導分化時間也簡化了組培操作程序。?

叢生芽增殖誘導和叢生苗生根誘導中加入土豆泥目的是為組培苗提供營養物質，加速叢生芽快速生長，這樣縮短組培快繁實施周期到45-50天左右，比忘萱草‘紅寶石’花托為外植體的組培快繁周期(2個月)短10-15天，采用本發明實施方式可以進行大規模快速組培苗生產。?

附圖說明

圖1三年生開花的忘萱草‘紅寶石’；圖2采集春季3-4月份忘萱草‘紅寶石’植物材料；圖3切割帶有鱗莖芽外植體小塊；圖4啟動3-4天的鱗莖芽；圖58-12天后分化增殖出的7-8個叢生芽；圖6誘導苗發出3-4個側根。?